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2009年03月18日

【期刊论文】HBVPreS2反义寡核苷酸对HepG2.2.15细胞系HLA-I类抗原表达及生物活性的影响*

马春红, 丁培芳, 孙汶生, 王勤友, 蒋保云, 曹英林

山东大学学报(医学版),2002,40(3):202~204,-0001,():

摘要

目的:观察针对乙型肝炎病毒(HBV)PreS2基因特异性反义寡核苷酸(asON)对转基因细胞HepG2.2.15表面的人类白细胞Ⅰ类抗原(HLA2I)基因表达的影响。方法:设计合成互补于HBV PreS2翻译起始区的反义寡核苷酸即序列Ⅰ,并设非互补序列作对照即序列Ⅱ,免疫细胞化学染色观察asON对HepG2.2.15表面表达的HLA-I类抗原的影响,用ELISA法动态检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg的变化,放射免疫测定法检测asON对宿主细胞自身分泌蛋白2血清铁蛋白的影响。结果:HepG2.2.15细胞表面HLA-I类抗原表达降低,用药组和对照组相比有统计学意义(P<0.05)。asON能够抑制HBV表达HBsAg和HBeAg,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为66%和91%,而序列Ⅱ对HBsAg和HBeAg的抑制率均为11%。asON对宿主细胞自身分泌蛋白无影响,即对宿主细胞无毒性作用。结论:asON以序列特异性方式抑制HBV基因表达而对宿主细胞无毒性作用,HLA-I类抗原表达降低,这对减轻过度炎症反应,阻止慢性肝炎至重症肝炎的发生具有重要意义。

关键词: 寡核苷酸类,, 反义, 肝炎病毒,, 乙型, HLA抗原

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2009年03月18日

【期刊论文】反义寡核苷酸抗HBV作用的双峰现象

马春红, 孙汶生, 张利宁, 曹英林, 宋静, 刘素侠, 丁培芳

世界华人消化杂志,1999,7(8):708-709,-0001,():

摘要

HBV基因组含3.2kbDNA,有至少4个ORF,其中S区包含S基因,pre-S1基因和pre-S2基因,编码形成大、中、小3种蛋白,构成HBV的包膜蛋白(HBsAg, preS1Ag, preS2Ag)。其中HBsAg在体内引起的免疫病理反应是HBV感染中的重要致病机制,preS2Ag较HBsAg有更强的抗原性,并具有反式激活作用,在HBV感染及肝癌发生中关系密切。因而如何从基因水平抑制HBsAg和preS2Ag的表达,对抗HBV治疗有重要意义。我们设计了针对S基因翻译起始区和preS2基因翻译起始区的反义寡核苷酸(asON)作为基因封条,作用于HepG2.2215细胞,对其抑制作用进行研究,并首次报道了asON抑制作用的双峰现象,为开发新型抗HBV基因药物奠定基础

关键词: 乙型肝炎病毒, 寡核苷酸类,, 反义, 乙型肝炎表面抗原, 乙型肝炎核心抗原

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