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2009年11月08日

【期刊论文】c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞增殖的调节作用及机制

周元国, 刘霞, 李平, 张恩, 刘萍, 周萍

细胞生物学杂志,2005,27:559~564,-0001,():

摘要

c-ski是成纤维细胞增殖的复杂调节子,它对中胚层来源的皮肤成纤维细胞增殖的作用还不清楚.在观察正常成纤维细胞周期c-ski表达的时相特点的基础上,通过体外转染c-ski,观察它对细胞增殖活性、细胞周期进展以及周期蛋白表达的影响.结果显示:c-ski mRNA表达在加入血清后开始升高,在细胞周期G,期的高峰期达到峰值,S期显著下降,在G2/M期维持在较低的水平;转染的c-ski可以以剂量依赖的方式增加细胞的增殖活性,并且可以逆转Smad3对细胞增殖活性的抑制作用;C-ski使成纤维细胞提前达到Go/Gi期的最低点,进入S期;同时细胞Gi期周期蛋白cyclinD的表达增加.这些结果表明:c-ski是皮肤成纤维细胞Gi期的调节子,通过加快G,期进展促进增殖,抑制Smad3活性,促进cyclinD的表达可能与这一作用的分子机制有关.

关键词: c-ski, 成纤维细胞 增殖, 细胞周期

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2005年11月15日

【期刊论文】全反式维A酸对UVA诱导人成纤维细胞胶原合成的影响

谭升顺, LEI Xiao-bing, TAN Sheng-shun, PENG Zhen-hui, et al

中国皮肤性病学杂志,2004,18,(4):202~204,-0001,():

摘要

目的 探讨全反维A酸(at-RA)对UVA诱导人成纤维细胞胶原生物合成的影响,为应用全反式维A酸治疗光老化皮肤病提供实验依据。方法 正常人来源的单层培养的皮肤成纤维细胞,经UVA照射后立即加入含不同浓度at-RA的培养液,共2天,用MTT法检测细胞增殖情况,3H脯氨酸检测细胞原民情况。结果 在各组之间细胞增殖差别无显蓍性时,at-RA浓度为10-6mmol/L和10-5mmol/L的实验组比对照组的细胞胶原合成显著增高(p<0.05,p<0.01);而at-RA浓度为10-4浓度为10-6mmol/L的实验组比对昭组胞胶 合成显著降低(p<0.01)。结论 在体外细胞培养情况下,相对低浓度的at-RA (10-6mmol/L,10-5mmol/L) 可逆转UVA诱导人成纤维细胞原生物合成的降低,面对高浓度(10-4mmol/L)则不能。

关键词: 全反式维A酸, UVA, 成纤维细胞 增殖, 胶原

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2005年09月28日

【期刊论文】基因治疗促进移植气管血运重建的实验研究

周刚, 张启旭, 王春梅, 周爱儒

中华外科杂志,2004,42(10):622~626,-0001,():

摘要

目的了解基因治疗对移植气管早期血运重建及延长移植气管长度的作用。方法直流电脉冲介导重组质粒pcDNA311Pmyc2His(2)C2bFGF 和pCD22VEGF121分别转染兔胸骨乳突肌肉瓣,于术后3、7、14、21、28d应用组织化学和免疫组织化学检查碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF121)外源基因蛋白在该肌肉瓣的表达及其促血管生成的生物学效应;分别以bFGF基因和VEGF121基因转染单侧胸骨乳突肌肉瓣和双侧胸骨舌骨肌肉瓣,用转基因肌肉瓣包裹并结合基因缝线方法对兔颈部10个环自体移植气管进行基因治疗,观察对其成活的影响。结果pcDNA3-1/myc-His(-)C-bFGF 和pCD2-VEGF121重组质粒分别转染在体肌瓣,获得bFGF和VEGF121外源基因蛋白高水平表达。转基因肌肉产生血管增生,血流增强的生物学效应。转基因肌肉瓣包裹并结合基因缝线方法对移植气管进行基因治疗,使兔颈部10个环移植气管血运建立并长期存活,与对照组相比差异有显著性意义(P<0101)。bFGF,VEGF121两基因治疗组差异无显著性意义。结论颈部肌肉瓣包裹结合一次性基因治疗能够促进移植气管早期血运建立,延长移植气管长度。

关键词: 基因, 治疗, 气管, 组织移植, 成纤维细胞生长因子, 碱性, 内皮生长因子

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2005年09月28日

【期刊论文】碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体的构建及表达

周刚, 张启旭, 陆佳韵, 刘芝华

中国修复重建外科杂志,2004,18(5):435~439,-0001,():

摘要

目的构建人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast grow th facto r,bFGF)真核表达质粒,研究其在体内外的表达。方法通过基因克隆技术,构建并大量制备pcDNA 3.1/myc-His(-)C-bFGF真核表达体系,RT-PCR和细胞免疫组织化学方法检测体外瞬时表达情况;直流电脉冲介导重组质粒pcDNA 3.1/myc-His(-)C-bFGF和pCD2-血管内皮细胞生长因子121(vascularendo thelial growth factor, VEGF121)在兔颈部肌肉瓣内转移并表达, 测定其促血管生成的生物学效应。结果构建的pcDNA3.1/myc-His(-)C-bFGF真核表达体系成功转染体外培养HeLa细胞,目的基因在mRNA水平和蛋白水平均有表达。pcDNA3.1/myc-His(-)C-bFGF和pCD2-VEGF121重组质粒分别转染在体肌瓣,获得外源基因高水平表达。转基因肌肉发生血管增生、血流增强的生物学效应。结论构建了人bFGF真核表达质粒,并可在体内外顺利表达,为进一步组织移植或组织工程基因治疗研究奠定了基础。

关键词: 碱性成纤维细胞生长因子, 基因克隆, 基因表达

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