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2009年08月07日

【期刊论文】JNK信号传导通路在砷剂治疗的血病中的作用

李殿俊, 张莹, 周晋, 常金兰

中国肿瘤,2004,13(4):264~266,-0001,():

摘要

[目的]探讨在三氧化二砷(As203)抑制急性早幼粒白血病细胞(NB4)生长并诱导其凋亡过程中,c-junN端激酶(c-junN-terminalkinase,JNK)信号传导通路的作用。[方法]用3H-胸腺疃啶掺人试验和DNA梯形电泳证明As2O3,的抑制细胞生长和诱导细胞凋亡作用。加入或不加入各种信号通路抑制剂的细胞暴露于As2O3后,提取蛋白质与不同的抗体杂交。[结果]8μmol/LAs203,作用于NB4细胞48h.3H-胸腺嘧啶掺人率下降60%,与2μmol/L相比,差异有显著性P<0.01)。且可产生最大程度的DNA断裂。JNK的活化在As2O3作用后lOmin即可产生.2h后逐渐减少,Caspase 的活化在AS203作用后8h可产生。特异性的JNK通路抑制剂可阻断As203诱导的JNK、Caspase活化,而Caspase抑制剂只能抑制Caspase活化,不能抑制JNK的话化。[结论]As203可抑制NB4细胞生长并诱导其凋亡,其过程是由活化的JNK及其下游的Caspase介导。提示JNK途径的激活可能是肿瘤治疗的重要方向。

关键词: 信号传导, 白血病, 治疗

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2009年08月07日

【期刊论文】人 IL-2重组腺病毒转染人肺腺癌细胞的体外生物学特性及体内抗肿瘤研究①

李殿俊, 田长富, 李殿俊②, 刘旭, 李天天, 刘辉

,-0001,():

摘要

目的:研究感染hIL-2重组病毒的人肺腺癌细胞(Anip973)的体外生物学特性及小鼠体内抗肿瘤作用。方法:将携带有hIL-2基因的重组腺病毒(rAd-hIL-2)感染人肺腺癌细胞系,通过细胞生长实验、克隆形成实验等观察其对Anip973肿瘤细胞的作用;利用PCR技术对转染后的细胞进行检测并应用ELISA试剂盒检测转染后的细胞IL-2的分泌量;通过肿瘤局部注射rAd-hIL-2的方法观察其在小鼠体内的抗肿瘤作用。结果:rAd-hL2经扩增、纯化后,滴度可达10l0PFU/ml,当病毒量为30MOI时,对Anip973细胞的转染率达90%以上。转染的Anip973肿瘤细胞其生长能力、克隆形成率等无明显变化。24小时细胞培养上清IL-2的分泌量为20pg/lml/2×105细胞。体内实验表明注射rAd-hIL-2的小鼠肿瘤生长缓慢,体积明显小于对照组(P<0.05),生存期显著延长。结论:腺病毒介导的细胞因子基因hIL-2转染的Anip973肿瘤细胞体外生物学特性未见明显变化,而体内实验则有明显的抗肿瘤作用。

关键词: 重组腺病毒, 肿瘤, 基因治疗 细胞因子

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2009年08月07日

【期刊论文】hTNF-a重组腺病毒转染人肺腺癌细胞的体外生物学特性及体内抗肿瘤研究

李殿俊, 田长富, 申宝忠, 刘旭, 李天天

中国肿瘤生物治疗杂志,2002,9(2):113~116,-0001,():

摘要

目的:研究携带hTNF-a基因的第二代重组腺病毒对人肺腺癌细胞系Ani973的体外生物学特性的影响,探讨重组腺病毒在体内抗肿瘤作用。方法:将携带有hTNF-a基因的重组腺病毒(rAd-hTNF-a)感染人肺腺癌细胞系,通过细胞生长实验、克隆形成实验、流式细胞分析、形态学检查等观察其对Anip973肿瘤细胞的作用;利用PCR技术对转染后的细胞进行检测并应用ELISA试剂盒检测转染后的细胞TNF-a的分泌量;通过肿瘤局部往射rAd-LacZ,rAd-hTNF-a的方法观察其在小鼠体内的抗肿瘤作用。结果:rAd-hTNrF-a经扩增、纯化后,滴度可这1010PFC/ml,在30MOl时,对Anip973细胞的转染率达90%以上。转染的Anip973肿瘤细胞除表面结构和超微结构有轻微变化外,其生长能力、克隆形成率及细胞周期等无明显变化。24h细胞培养上清TNF-a的分泌量为20pg/ml细胞。体内实验表明注射rAd-LacZ,rAd-hTNF-a的小鼠肿瘤生长缓慢,体积明显小于对照组(P<0.05),生存期显著延长。结论:腺病毒介导的细胞因子基因hTNF-a转染的Anip973肿瘤细胞未见明显变化,而体内实验则有明显的抗肿瘤作用。

关键词: 重组腺病毒, 肿瘤, 基因治疗 细胞因子

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2009年08月07日

【期刊论文】转基因人胃腺癌细胞(MKN45/IL-2)的体外生物学特性及体内抗肿瘤作用研究

李殿俊, 李莹, 王志华, 张春艳, 马占好, 扬悦

2004,18(1):22~24,-0001,():

摘要

目的 研究转hIL-2基因的人胃腺癌细胞(MKN45/IL-2)的体外生物学特性及小鼠体内抗肿瘤作用。方法 以逆转录病毒PLXSN为载体,人白细胞介索2基因(hIL-2)为目的基因转染人胃腺癌细胞系,利用PCR按术对转染后的胞进行检测并应用ELISA试剂盒检测转染后的细胞IL-2的分泌量;利用MFT法绘制生长曲线;然后建立人胃腺癌细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,以肿瘤体积、抑瘤率、生存期等指标观察MKN45/IL-2对移植癌的抑制作用。结果 转染后的MKIV45肿瘤细胞体外生长能力无明显变化。24小时细胞培养上清IL-2的分泌量为l00-20Ou/lO5细胞,体内实验表明MKN45/IL-2治疗组的移植瘤生长速度缓慢,体积明显小于生理盐水对照组(P<0.05),生存期显著延长(P<0-05)。结论 逆转录病毒介导的hIL-2转染的MKN45肿瘤细胞体外生物学特性未见明显变化,而体内实验显示具有明显的抗肿瘤作用。

关键词: 基因治疗 胃腺癌, IL-2

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