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2006年08月16日

【期刊论文】端粒酶逆转录酶与核因子KB/p65在喉鳞状细胞癌中的表达

陶泽璋, 潘松, 吴立连, 肖伯奎, 陈始明

CHIN ARCH OTOLARYNGOL HEAD NECK SURGIMay 2005, Vo1.12, No.5,-0001,():

摘要

目的 探讨端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)和核因子KB/p65(NF-B/p65)在喉鳞状细胞癌中的表达及两者间可能存在的相互关系。方法采用免疫组化SP法检测41例喉鳞状细胞癌和1O例声带息肉组织中TERT和NF-KB/p65的表达水平。结果TERT和NF-KB/p65在喉鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为78.O5%和68.29%,声带息肉中几乎未见TERT和NF-KB/p65的表达。定性分析发现TERT与喉鳞状细胞癌的T分级、淋巴结转移和肿瘤临床分期有关。相关分析显示NF-KB/P65与TERT呈正相关。结论①TERT和NF—KB/p65参与了喉癌的发展过程;②TERT有望作为防止喉鳞状细胞癌进一步恶化的治疗靶点;③喉鳞状细胞癌中NF-KB/p65促进了TERT的表达。

关键词: 喉肿瘤, 癌,, 鳞状细胞, 端粒,, 末端转移酶, 癌基因蛋白质P65(, gag-jun), 息肉, 免疫组织化学

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2006年08月16日

【期刊论文】核因子κB/p65与环氧合酶2在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义*

陶泽璋, 潘松△, 吴立连, 肖伯奎, 陈始明

临床耳鼻咽喉科杂志,2005,19(12):535-537,-0001,():

摘要

目的:探讨核因子κB/p65(NF-κB/p65)和环氧合酶2(COX-2)在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达和临床意义及两者间可能存在的相互关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测41例LSCC和10例声带息肉组织中NF-κB/p65和COX-2蛋白的表达水平。结果:NF-κB/p65和COX-2蛋白在喉癌组与对照的声带息肉组比较有显著性差异。进一步定性分析发现COX-2与喉癌的组织病理学分化程度有关。Spearman相关分析显示NF-κB/p65与COX-2高度相关。结论:①喉癌中NF-κB/p65与COX-2的表达均升高。②NF-κB/p65可能促使COX-2的表达。③NF-κB/p65可能成为喉癌治疗的新靶点。

关键词: 喉肿瘤, 癌,, 鳞状细胞, 核因子κB/, p65, 环氧合酶2

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2006年08月16日

【期刊论文】小干扰RNA对喉鳞状细胞癌裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原及p53蛋白表达的影响

陶泽璋, 周俊旭△, 周绪红, 肖伯奎, 陈始明, 刘丹

J Clin Otorhinolaryngol (China), Mar 2006, Vol 20, No6,-0001,():

摘要

目的:应用小干扰RNA(siRNA)技术抑制裸鼠喉癌皮下移植瘤人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达,探讨移植瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)及p53蛋白表达的变化。方法:根据hTERTcDNA序列构建表达短发夹RNA(shRNA)的、靶向hTERTmRNA的真核表达质粒pshRNA,其载体质粒含荧光素报告基因。建立人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株裸鼠皮下接种模型,将pshRNA转染入荷瘤裸鼠瘤体内,观察肿瘤生长情况。以激光共聚焦显微镜观察质粒在瘤体内的表达;以免疫组织化学SP法检测PCNA及p53蛋白在肿瘤内的表达。结果:所有裸鼠均接种成功,5d后可见皮下肿瘤形成,14d 左右肿瘤直径达5~7mm。pshRNA及空质粒载体转染入瘤体后,共聚焦显微镜下见癌组织中有绿色荧光表达。病理学检查发现:pshRNA组肿瘤生长受到抑制,细胞分裂少见,可见大量癌细胞坏死。与注射生理盐水的对照组比较,转染质粒完毕后7d抑瘤率为76.50%,P<0.01。pshRNA治疗后瘤体内PCNA蛋白表达显著下调(P<0.05),p53蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论:靶向hTERTmRNA的shRNA可显著抑制人喉癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是诱导PCNA 下调,促进p53蛋白表达所致。

关键词: 喉肿瘤, 癌,, 鳞状细胞, 小干扰RNA, 人端粒酶逆转录酶, 增殖细胞核抗原, p53蛋白

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2006年08月16日

【期刊论文】短发夹RNA沉默hTERT基因对人喉癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

陶泽璋, 刘丹, 肖伯奎, 陈始明, 池花明

《癌症》Chinese Journal of Cancer, 2006, 25 (1): 11- 16,-0001,():

摘要

背景与目的:RNA干扰( RNA interference,RNAi) 是指双链RNA导入细胞后诱导靶mRNA发生特异性的降解,导致基因转录后沉默的现象。RNAi在基因功能和抗病毒基因治疗等方面均有报道。但对喉癌等头颈恶性肿瘤中高表达的人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因,目前尚未见报道。本课题利用RNAi 技术,研究短发夹RNA(short hairpinRNA,shRNA)抑制hTERT基因表达对裸鼠喉鳞状细胞癌皮下移植模型的抑瘤作用。方法:根据hTERT cDNA序列构建表达hTERT mRNA特异的、含荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA。建立人喉癌Hep-2细胞株裸鼠皮下接种模型。将pshRNA转染入荷瘤裸鼠瘤体内,观察肿瘤生长情况。以激光共聚焦显微镜观察质粒在瘤组织内的表达;以HE染色法观察质粒治疗后瘤组织的病理改变;以原位末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞的凋亡情况;以免疫组化SP法检测hTERT蛋白在肿瘤内的表达;光镜下观察心、肝、肾、脾结构的改变并测量血液学和血液生化指标。结果:pshRNA组(A组)、空质粒载体组(B组)与生理盐水组(C组)之间比较,A组与C组瘤体积有显著性差异(P<0.01),B组与C组之间瘤体积无显著性差异(P>0.05),抑瘤率为76.50%。pshRNA及空质粒载体转染入瘤体后,共聚焦显微镜下见大量的癌细胞表达绿色荧光。病理学检查及TUNEL检测发现:A组肿瘤生长受到抑制,细胞分裂相少见,可见大量肿瘤细胞坏死及凋亡,该组肿瘤细胞的凋亡指数[(26.47±4.25)%]明显高于B组[( 3.40±1.41)%]和C组[(2.73±1.35)%]。给予pshRNA后瘤体内hTERT蛋白表达明显下调,而且对心、肝、肾、脾无明显损害,对造血系统无影响。结论:表达shRNA的DNA载体质粒沉默hTERT基因可显著抑制人喉癌裸鼠肿瘤的生长,而且对心、肝、肾、脾及造血系统无明显的毒副作用。

关键词: 喉肿瘤, 短发夹RNA, hTERT, 癌,, 鳞状细胞

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