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2009年10月21日

【期刊论文】大肠杆菌可溶性表达人碱性纤维细胞生长因子的研究

洪岸, 孙晋华, 洪岸*, 张玲, 孙奋勇, 宋照熙

微生物学报,2003,43(4):448~452,-0001,():

摘要

包涵体的形成与外源基因在大肠杆菌中的表达量高度相关,在适当的范围内,降低hbFCF在表达宿主BL21(DE3)plysS中的表达,成为实现高可溶性表达的关键。在不改变氨基酸序列的条件下,对hbFCF高表达菌株突变重组子起始密码ATC下游前3个密码子的摇摆碱基进行随机回复突变,共有7种组合,合成引物PCR扩增后,克隆至表达载体pET-3e,将重组子转导BL21(DE3)plysS后,IPTC诱导表达,发现其中1株有较高可溶性和活性的菌株。可见部分降低外源蛋白的表达量可以避免与减少包涵体的形成。

关键词: 可溶性表达,, 包涵体,, 碱性成纤维细胞生长因子,, 大肠杆菌,, 回复突变

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