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2009年10月21日

【期刊论文】碱性成纤维细胞生长因子对小鼠脾脏细胞凋亡的抑制作用*

洪岸, 许艳丽, 李校坤, 林剑, 刘树铮

中国病理生理杂志,2000,16(2):131~134,-0001,():

摘要

目的和方法:X射线照射结合无血清培养诱导小鼠脾细胞凋亡,采用流式细胞术定量分析碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对睥细胞凋亡的抑制作用,井采用淋巴细胞转化试验[3H]-TdR掺人法检测bFGF对脾细胞的增殖效应。结果:小鼠经过不同剂量X射线照射、脾细胞再经过不同时程无血清培养,都出现了典型的亚二倍体Ap峰,1μg/mL和2μg/mL的bFCF均可降低Ap峰中的细胞数(细胞凋亡率)。并能显著增强睥细胞的增殖反应能力。结论:bFCF可抑制外周免疫器官脾细胞的凋亡、井促进其增殖。增强机体免疫力。

关键词: 成纤维细胞生长因子、碱性 脾, 细胞, 小鼠

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2009年10月21日

【期刊论文】大肠杆菌可溶性表达人碱性纤维细胞生长因子的研究

洪岸, 孙晋华, 洪岸*, 张玲, 孙奋勇, 宋照熙

微生物学报,2003,43(4):448~452,-0001,():

摘要

包涵体的形成与外源基因在大肠杆菌中的表达量高度相关,在适当的范围内,降低hbFCF在表达宿主BL21(DE3)plysS中的表达,成为实现高可溶性表达的关键。在不改变氨基酸序列的条件下,对hbFCF高表达菌株突变重组子起始密码ATC下游前3个密码子的摇摆碱基进行随机回复突变,共有7种组合,合成引物PCR扩增后,克隆至表达载体pET-3e,将重组子转导BL21(DE3)plysS后,IPTC诱导表达,发现其中1株有较高可溶性和活性的菌株。可见部分降低外源蛋白的表达量可以避免与减少包涵体的形成。

关键词: 可溶性表达,, 包涵体,, 碱性成纤维细胞生长因子,, 大肠杆菌,, 回复突变

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2011年03月28日

【期刊论文】耐热碱性磷酸酶功能结构域的进一步定位

许晓风, 郁锋, 许晓风*

中国生物化学与分子生物学报,2004,20(1):89~94,-0001,():

摘要

为了进一步精确定位耐热碱性磷酸酶(TAP)的功能结构域和建立酶功能结构域定位的有效方法,在对TAP进行序列相容性比对及二级结构统计预测的基础上,以二级结构单元的完整性为依据对其功能结构域进行定位.TAP的功能结构域在35~476氨基酸之间,记为TAPN34C25(TAP的N端去掉34个氨基酸而C端去掉25个氨基酸),比盛小禹等定位的少15个氨基酸.克隆、表达实验结果证明了TAPN34C25的酶学活性,其最适反应温度为72℃,比TAPND27(N端去除了27个信号肽氨基酸的TAP)上升了7℃,而最高耐受温度为83℃,比TAPND27下降了16℃.实验结果表明,以二级结构预测结果进行酶功能结构域定位是一种更为精确的方法.

关键词: 耐热碱性磷酸酶,, 功能结构域,, 序列相容性比对,, 二级结构统计预测

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