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2009年07月14日

【期刊论文】T3对人神经干细胞分化为少突胶质细胞的影响

李兰英, 刘奔, 刘春蓉, 庞智玲

解剖学报,2003,34(2):213~216,-0001,():

摘要

目的 以体外诱导生成的人神经干细胞(NSCs)为模型,研究甲状腺激素(TH)对其分化的影响。方法 无菌状态下取因治疗目的而终止妊娠的胎龄10-22周的人胎大脑半球,机械法分散细胞后,以105个/ml细胞密度接种于含N-2配方的DMEM/F12培养基中,同时添加表皮生长因子(EGF,20μg/L)和/或碱性成纤维生长因子(bFGF,20μg/L)。采用自然分化以及T3诱导的方法诱导分化,免疫组织化学方法鉴定分化后的细胞类型,抗体分别为NF-200、GFAP、Ga1-C,并采用抗MBP、O4、A2B5抗体鉴别少突胶质细胞发育的不同阶段。结果 T3有助于向胶质细胞方向发展。包括少突与星形胶质细胞,MPB阳性细胞比例超过80%,尤其在EGF+T3组,这种现象更为突出。结论 NSCs的定时分化是内外源信号共同作用的结果。TH就是这样一种信号,激活“生物钟”机制的效应组件。在有限次的分化后诱导NSCs分化为少突胶质细胞。

关键词: 神经干细胞, 甲状腺激素, 表皮生长因子, 碱性成纤维生长因子, 少突胶质细胞

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2009年03月27日

【期刊论文】外源性碱性成纤维细胞生长因子对缺血大鼠脑内源性碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

叶诸榕, 陆锦标, 刘颖, 施建英

中国神经科学杂志,2004,20(4):290~294,-0001,():

摘要

目的 研究外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)缩小局灶性脑缺血梗死灶的机制。方法 用免疫组化ABC法检测在局灶性脑缺血模型上给予生理盐水或bFGF后早期生长反应蛋白-1(Egr-1),bFGF,碱性成纤维细胞生长因子受体(bFGFR)的动态表达。结果给药组在3h-3d各时间段梗死灶均有不同程度的缩小。对照组和给药组Egr-1表达均表现为3~6h的增强过程,但给药组更强于对照组。对照组12h见有bFGF表达增强,而bFGFR表达3h到达高峰,6h起下降,12h时bFGFR的表达已恢复至正常水平(出现了配体和受体表达时相上不匹配)。给药组bFGF表达提前且增强,3h即见有bFGF表达增强,6h时出现第一峰,从而与bFGFR 3~6h的表达增强过程相吻合。结论 外源性bFGF能缩小梗死灶,该神经保护作用是通过Egr-1蛋白高表达使内源性bFGF的表达增高且提前,从而与bFCFR的表达增强过程重叠而实现的。

关键词: 脑缺血, 碱性成纤维细胞生长因子, 碱性成纤维细胞生长因子受体

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2009年03月27日

【期刊论文】bFGF, bFGFR及Egr-1基因蛋白在大鼠局灶性脑缺血后的表达

叶诸榕, 刘颖, 陆锦标, 朱建辉, 张秀荣, 赵仲华

中国神经科学杂志,2002,18(3):602~606,-0001,():

摘要

观察持续性局灶性脑缺血(permanent middle cerebral artery oeellasion, pMCAO)损伤后表达碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblas growth factor, bFGF)的细胞种类、时相与不同细胞之间的相互影响,并探讨Egr-1基因蛋白对bFGF表达的影响。结果表明:在持续性局灶性脑缺血后,缺血梗死灶周边区免疫组化结果显示bFGF表达出现双相增强。缺血1h缺血边缘区主要在星形胶质细胞(Astrocyte, As)中bFcF出现一过性增强,并见细胞外基质中出现bFGF点状着色。缺血6h~1d时bFCF染色再次增强,神经元及各类胶质细胞中的表达均有增强。但是经Western-blot定量测定发现脑组织bFGF含量仅在缺血后6h~1d时出现增强。缺血1h时,bFGF可能经缺血细胞受损的细胞膜到达细胞外,与细胞外硫酸肝素或相关分子结合,内化进入缺血边缘区细胞,从而造成bFGF免疫组化染色一过性增强。第二次增强可能是缺血损伤刺激及内化的bFGF诱导的蛋白合成的增加。缺血2~6h bFGFR在神经元及各类胶质细胞中的表达均增强,主要位于缺血区的边缘。由于bFGFR表达时程早于bFGF转录合成增加,因此限制了内源性bFGF发挥保护缺血损伤神经元的作用,这使得外源应用bFGF成为必要。Egr-1基因蛋白的表达在缺血损伤后1~6h增强,其表达增高的时相早于bFGF蛋白转录合成的增加,并且因为其能够促进bWGF启动子的活性,因而可能在bFGF自分泌机制中发挥重要作用。

关键词: 碱性成纤维细胞生长因子(, bFGF), 碱性成纤维细胞生长因子受体(, bFCFR), 早期生长反应蛋白-1(, Egr-1), 脑缺血

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2009年03月27日

【期刊论文】大鼠持续性灶性脑梗死区血脑屏障改变对125I-碱性成纤维细胞生长因子通透的影响*

叶诸榕, 刘颖, 陆锦标

复旦学报(医学版),2002,29(2):79~83,-0001,():

摘要

目的 系统观察大鼠持续性局灶性脑缺血(permanent oriddle cerebral artery occlusion, pMCAO)后0.5h到14d血脑屏障(blood-brain bamier, BBB)的损伤及对碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)通透的影响。方法 采用抗BBB抗体的免疫组化方法显示pMCAO后不同时间BBB结构的改变。采用125I标记bFGF示踪法显示静脉注射125I-bFGF后脑组织7射线计数变化表示bFGF通透性的变化。结果 在动脉桂塞后O.5h抗BBB免疫组化染色显示毛细血管壁的结构已发生改变,即使到了14d时大量新生毛细血管出现在梗死区周围,但是抗BBB抗体免疫组化仍为阴性,表明此时血管壁尚未达到完全修复。从梗死后2h开始125I-bFGF通透有明显的增加,持续到梗死后14d,125I-bFGF主要出现在基底节及梗死累及的岛叶和顶叶皮层。结论脑缺血后外周静脉应用bFGF是可行的,尽早应用bFGF对保护神经元是至关重要的。

关键词: 125-I碱性成纤维细胞生长因子, 持续性局灶性脑缺血, 血脑屏障

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