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2008年04月09日

【期刊论文】采用肌卫星细胞及异种无细胞基质构建组织工程膀胱的研究

张玉石, 李汉忠, 张锐强, 王彭, 严维刚

中华泌尿外科杂志2006年4月第27卷第4期 Chin J Urol, ADril 2006, Vol 27, No. 4,-0001,():

摘要

目的 探讨应用组织工程膀胱进行膀胱替代修复的可行性。方法 采用自体肌卫星细胞(MDSC)和猪膀胱无细胞基质(PBAM)构建兔组织工程膀胱。应用Percoll非连续密度梯度离心法分离纯化培养兔MDSCs,采用去污剂洗涤法对新鲜猪膀胱进行脱细胞处理获得PBAM。MDSCs接种于PBAM表面并进行短暂体外培养,获得组织工程膀胱。雄性新西兰兔行膀胱大部分切除术,分别采用PBAM及构建的组织工程膀胱进行替代修补,每组6只,1、4、8、12周后进行膀胱造影并取材观察修复组织再生情况。结果 非连续密度梯度离心法所得细胞纯度> 90%。酶消化法能有效去除膀胱中细胞成分,光镜及电镜观察无细胞成分残留,细胞毒性测定为1级,细胞相容性好。1周后所构建组织工程膀胱修补吻合区生长良好,12周后修补区组织结构基本接近正常膀胱,容积达到正常膀胱的80%,2组比较差异有统计学意义(P< 0.05)。结论 采用MDSC及PBAM构建的组织工程膀胱是理想的膀胱替代修补材料。

关键词: 组织工程 膀胱, 肌, 卫星细胞, 膀胱无细胞基质

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2008年04月09日

【期刊论文】应用Percoll分离纯化组织工程用肌卫星细胞

张玉石, 李汉忠, 张锐强, 王彭, 严维刚

中国医学科学院学报/ ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE April, 2006 Vol. 28 No. 2,-0001,():

摘要

目的 探讨应用改良Percoll非连续密度梯度离心法分离纯化培养组织工程用肌卫星细胞。方法 分别采用差速贴壁法和Percoll非连续密度梯度离心法进行兔肌卫星细胞的原代培养、光镜及扫描电镜检查细胞形态,通过免疫细胞化学染色方法鉴定培养细胞纯度,噻唑蓝法测定细胞生长曲线。结果 差速贴壁法所得细胞纯度为30%~40%,Percoll非连续密度梯度离心法所得细胞纯度在90%以上,两种方法光镜及电镜检查均符合卫星细胞形态,细胞生长曲线显示细胞生长状况良好。结论 应用Percoll非连续密度梯度离心法可以得到高纯度的肌卫星细胞,可以作为组织工程用种子细胞的培养方法。

关键词: 肌卫星细胞, Percoll, 组织工程 分离, 纯化

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2008年04月09日

【期刊论文】组织工程猪膀胱无细胞基质的制备

张玉石, 李汉忠, 张锐强, 王彭

中华医学杂志2005年10月12日第85卷第38期 NatlMed J China, October 12, 2005, Vol 85, No. 38,-0001,():

摘要

目的 探讨猪膀胱无细胞基质制备的方法及其作为生物支架材料应用于组织工程膀胱构建的可行性。方法 分别采用酶消化法和去污剂洗涤法对新鲜猪膀胱进行脱细胞处理并进行HE染色及电镜检查。应用MTT法进行细胞毒性测定。对5只新西兰兔行大部分膀胱切除术后,采用异种膀胱无细胞基质修补,6周后取材观察修复组织再生情况。结果 两种方法均能去除膀胱中细胞成分,光镜及电镜观察无细胞成分残留,细胞毒性测定为1级,细胞相容性好。兔膀胱修补后6周支架材料上有移行上皮及肌肉组织生长。结论 经脱细胞处理的猪膀胱无细胞基质具有良好的组织相容性,有作为组织工程膀胱支架材料的应用前景。

关键词: 膀胱, 替代医学, 猪, 组织工程

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