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2006年11月15日

【期刊论文】用去细胞同种异体神经构建猕猴组织工程化神经的实验研究

刘小林, 许扬滨, 胡军, 江长青, 杨光诗, 朱家恺

中华显微外科杂志,2005,28(2):136~139,-0001,():

摘要

目的评价用自体源骨髓问充质干细胞(MSCs)或许旺细胞(SCs)作种子细胞,与去细胞同种异体神经构建的组织工程化外周神经修复猕猴尺神经4cm缺损的实验效果,为临床研究提供资料。方法分别用4种移植物桥接猕猴4cm尺神经缺损。A组:种植自体MSCs的去细胞同种异体神经;B组:种植自体SCs的去细胞同种异体神经;C组:去细胞同种异体神经;D组:自体神经移植、通过功能学、神经电生理学及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果。结果A、B组术后6个月能引起小鱼际肌群产生复合动作电位的潜伏期、复合动作电位的最大振幅、神经传导速度和再生的神经纤维数目与自体神经移植组相比无统计学意义(P>0.05);但A、B、C、D组分别与C组相比,差异有统计学意义(P>0.05)?结论用自体源SCs或MSCs作种子细胞,与去细胞同种异体神经构建的组织工程化外周神经修复猕猴4cm尺神经缺损,均能取得与自体神经移植相近的效果。

关键词: 组织工程 外周神经, 神经移植物, 化学萃取, 猕猴

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2006年11月15日

【期刊论文】去细胞组织工程化神经支架的制备与形态学研究

刘小林, 朱庆棠, 朱家恺, 赖英荣, 江长青, 杨光诗, 胡军

中华显微外科杂志,2004,27(1):35~38,-0001,():

摘要

目的探讨如何去除人类长段粗大神经中的细胞。为构建人类组织工程化神经提供具有仿生结构的支架方法取4段长10cm、直径6mm人的胫神经,其中3段用3%三硝基甲苯和4%脱氧胆酸钠分别萃取1、2和3次,在萃取神经和未萃取神经的中段取材,行HE染色、砂罗铬花青染色和S-100免疫组化染色,在光镜和电镜下观察神经萃取前后形态学的变化结果用三硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取后,胫神经内的细胞消失,I纤维性支架结构与未经萃取的神经相仿,电镜下可见萃取后的神经由空的神经基底膜管和管之间的胶原纤维构成。随着萃取次数的增加,神经内残留的S-100蛋白显著减少,但反复萃取后神经的支架结构受破坏。结论用硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取2次可去除人体长段、粗大神经的细咆而保留完整的神经基底膜管和纤维支架结构,可能是制备具有仿生结构的人类组织工程化神经支架较为理想的方法。

关键词: 外周神经, 组织工程 人类, 化学萃取

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2006年11月15日

【期刊论文】猕猴骨髓问充质干细胞与去细胞神经优化人工神经的体外构建

刘小林, 杨光诗, 许扬滨, 朱家恺, 朱庆棠

中华显微外科杂志,2005,28(1):35~38,-0001,():

摘要

目的探讨猕猴骨髓间充质干细胞作为种子细胞与去细胞同种异体神经作为支架,体外构建人工神经的研究。方法采用密度梯度离心的方法分离并培养猕猴骨髓间充质干细胞,利用相差显微镜观察细胞生长情况并描绘其生长曲线;取猕猴3段4cm的周围神经,其中2段用4%triton-X-100及4%脱氧胆酸钠液分别萃取1次和2次,在新鲜神经和萃取神经中段取材,组织学检测及电镜学观察萃取前后的形态学变化;采用显微注射的方法把猕猴骨髓间充质干细胞种植到萃取两次的异体神经内,HE染色观察细胞在支架内的生长情况。结果猕猴骨髓间充质干细胞自我增殖能力强;萃取1次的异体神经细胞及髓鞘结构仍部分存留,而萃取2次的其细胞及髓鞘结构消失;HE染色可见细胞在萃取2次的异体神经内可爬行生长。结论猕猴骨髓间充质干细胞与化学萃取的去细胞同种异体神经适合体外构建人工神经。

关键词: 骨髓间充质干细胞, 组织工程 去细胞神经, 猕猴

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