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2006年10月27日

【期刊论文】兔关节软骨细胞的分离、培养和形态学特征

张志光, 郑卫平, 苏凯, 许跃

中山大学学报(医学科学版),2004,25,(1):63~66,-0001,():

摘要

【目的】探讨兔关节软骨细胞的分离、培养方法,观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况。【方法】无菌条件下,从2周龄新西兰白兔的颞颌关节及四肢关节髁突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨细胞,经台盼蓝拒染计数,将细胞按l×106个/孔接种于6孔培养板,传代培养,描绘生长曲线。利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态。应用甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定。【结果】每克软骨能获取1.5×106个软骨细胞,活性率为95%。培养2~3d,细胞贴壁、变形,呈多角形;8d左右,细胞融合成层。透射电镜观察显示细胞核圆形,有丰富的粗面内质网、高尔基体及分泌的基质成分。甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性。细胞传至5代后,出现“成纤维细胞样”。【结论】本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第2代细胞生长良好,适合于实验研究;软骨细胞5代培养后,细胞表型发生改变。

关键词: 关节,, 软骨/, 细胞学, 细胞培养 软骨细胞/, 超微结构

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