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2009年11月08日

【期刊论文】小鼠骨髓基质细胞的生物学特性及血管新生能力

黄岚, 张坡, 蒋世忠, 武晓静, 宋明宝

中华心血管杂志,20003,31(9):681~684,-0001,():

摘要

目的探讨体外培养的骨髓基质细胞的一些生物学特性及体内移植后在缺血区新血管生成中的作用。方法分离5~6周龄的小鼠胫骨、股骨,用预冷的DMEM/F12培养基冲洗出骨髓,经密度梯度离心分离出骨髓单个核细胞,接种后12~16 d形成单层贴壁的成纤维样细胞。体外诱导分化鉴定分离的细胞,用传代的细胞进行生长曲线测定,观察其接种贴壁率、分裂指数,检测细胞周期和超微结构,并建立下肢缺血模型。荧光标记的体外扩增的骨髓单个核细胞被移植入缺血组织。移植后2周,荧光显微镜及内皮细胞碱性磷酸酶染色,检查荧光阳性细胞与染色阳性细胞的时空关系。结果体外传代培养的单个核细胞倍增时间约为42 h。传代10 h贴壁率达90%以上。分裂指数曲线与生长曲线相似。细胞周期显示约83%的细胞处于G1期。结论体外培养的骨髓基质细胞生长稳定,传代后的细胞适应性强,增殖较快,表现出较早期细胞特点,在体外及移植入体内缺血区能分化为血管内皮细胞,有望用于改善组织缺血。

关键词: 骨髓细胞, 细胞培养 细胞分化, 血管, 缺血

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2009年04月19日

【期刊论文】人腹膜间皮细胞的培养及特征

刘伏友, 段绍斌, 龙志高, 肖平, 陈星, 潘乾, 罗季安, 彭佑铭

湖南医科大学学报,2001,26(4):321~324,-0001,():

摘要

目的:建立人腹膜司皮细胞(HPMC)培养模型,检测HPMC细胞外基质蛋白及白细胞介素(IL-8)的表达。方法:采用胰蛋白酶-EDIA消化法,从人的腹膜组织中分离HPMC。采用形态学和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(即SP法),对培养细胞进行鉴定。采用SP法检测HPMC纤维连接蛋白(FN)、胶原Ⅲ和胶原V及转化生长因子(TGF)β1表达。采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC IL-8 mRNA和FN mRNA的表达。结果:光镜示细胞融合后呈多边形,超微结构下可见丰富的微绒毛和内质网,免疫组化染色结果示HPMC可表达角蛋白,波形蛋白,胶原Ⅲ,FN,TGFβ1蛋白,Ⅷ因子、胶原V表达阴性。人腹膜司皮细胞亦表达FN mRNA和IL-8 mRNA。结论:HPMC培养模型的建立,可为进一步研究腹膜纤维化的防治及IL-8在腹膜透析中的作用提供理论依据。

关键词: 司皮细胞, 基质, 转化生长因子β1, 白细胞介素-8, 细胞培养

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2006年11月02日

【期刊论文】沙利度胺与利妥昔单抗协同抗骨髓瘤细胞作用的体外研究

李娟, 李娟*, 罗绍凯, 熊文杰, 周振海

Chinese Journal of Cancer, 2002, 21 (12): 1324-1327,-0001,():

摘要

背景与目的:利妥昔单抗(美罗华)的疗效与细胞膜上的CD20表达密度有关,如何提高多发眭骨髓瘤细胞膜上CD20的表达、增加美罗华对多发眭骨髓瘤的疗效,是目前临床尚未解决的司题。本文探讨沙利度胺是否能增强美罗华的抗骨髓瘤细胞作用及其可能的机制。方法:用10、50、75、100、150、200、300µg/ml的沙利度胺,05、1、2、4、8、12、16µg/ml的美罗华,上述7种浓度的沙利度胺联合16µg/ml的美罗华以及上述7种浓度的美罗华联合75µg/ml的沙利度胺分别加入18例初治和20例复发难治的多发眭骨髓瘤患者瘤细胞甲基纤维素的半固体培养体系中,观察它们对瘤细胞集落形成的影响,并用流式细胞仪测定经上述7种浓度沙利度胺处理前后瘤细胞表面CD20的表达情况。结果:初治多发眭骨髓瘤患者瘤细胞集落形成的抑制现象出现于:①单用浓度大于或等于75µg/ml沙利度胺或单用16µg/ml美罗华;②75µg/ml沙利度胺加或不加16µg/ml美罗华;③浓度大于或等于75µg/ml沙利度胺加或不加16µg/ml美罗华;复发难治多发眭骨髓瘤患者瘤细胞集落形成的抑制现象出现于:①75µg/ml沙利度胺加16µg/ml美罗华;②浓度大于或等于100µg/ml沙利度胺加或不加16µg/ml美罗华;浓度大于75µg/ml沙利度胺可增加复发难治多发眭骨髓瘤细胞CD20抗原的表达。结论:体外沙利度胺能增强美罗华对多发眭骨髓瘤细胞集落形成的抑制作用,这种增强作用与沙利度胺增加瘤细胞CD20抗原表达有关。

关键词: 多发眭, 骨髓瘤, 沙利度胺, 美罗华, 细胞培养 CD20

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2005年01月26日

【期刊论文】三七提取物对GES-1及其转化后细胞增殖抑制作用的实验研究

李军祥, 王志斌, 朱陵群, 牛福玲, 崔巍

,-0001,():

摘要

目的 通过细胞培养方法,由研究灌服三七提取物后的犬血清对胃癌前细胞的抑制作用入手,以期找出三七入血后的最佳作用时间点(段)。方法 采用永生化的人胃粘膜上皮细胞系GES-1 细胞以及MNNG 进一步转化GES-1 细胞后获得的MC 细胞作为胃癌前病变细胞的体外研究模型;以三七水提物给彼格犬1 次性灌胃,取给药前的血清、给药后不同时点的血清作为实验药物血清。以MTT 法分别检测每个采血时间点上不同的药物血清的浓度(8%、4%、2%)对GES-1 及MC 细胞作用72h 后的抑制情况,并根据结果找出最佳抑制的药物血清时点。结果 显示其中在2h 和6h 血清的含药血清刺激下的抑制率均为最高,两个时间点含8%药物血清的培养基对两种细胞的抑制作用均十分显著,其中2h 8%-GES-1组抑制率为70.8%(p<0.01); 2h 8%-MC 组抑制率为45.3%(p<0.01); 6h 8%-GES-1 组抑制率为88.5%(p<0.01); 6 h 8%-MC 组抑制率为42.4%(p<0.01)。结论 灌服三七提取物后2、6h 取的药物犬血清对GES_1 及MC 细胞的增殖抑制作用最强。

关键词: 三七, 胃癌,, 癌前病变, 细胞培养

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