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2009年04月23日

【期刊论文】大鼠牙囊细胞体外培养技术的建立及其鉴定

凌均棨, 凌均, 谷海晶, 高燕, 王阿丹

华西口腔医学杂志,2004,22(1):19~22,-0001,():

摘要

目的 建立体外培养大鼠牙囊细胞的方法,观察牙囊细胞体外生长的生物学特性。方法 分离乳鼠下颌第一、第二磨牙牙胚的牙囊组织,应用组织培养的方法进行牙囊细胞原代和传代培养。显微镜观察培养细胞的形态,电镜观察体内牙囊组织和体外培养的牙囊细胞的超微结构。免疫组化法检测细胞波形蛋白、Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白的表达。结果 分离组织培养24h后,梭形细胞和多角形细胞从组织块中游出,经消化排除法获得纯化的牙囊细胞。显微镜下牙囊细胞为成纤维细胞样,电镜下牙囊细胞无桥粒,胞浆中含有高密度电子颗粒和大量粗面内质网(RER)。免疫组化染色显示牙囊细胞表达波形蛋白、Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白。结论 运用组织培养和细胞生物学技术可以成功获得原代和传代培养的大鼠牙囊细胞,体外培养的细胞具有与正常大鼠牙囊细胞相一致的生物学特性。

关键词: 牙囊, 细胞培养 成纤维细胞, 牙齿萌出

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2006年10月27日

【期刊论文】兔关节软骨细胞的分离、培养和形态学特征

张志光, 郑卫平, 苏凯, 许跃

中山大学学报(医学科学版),2004,25,(1):63~66,-0001,():

摘要

【目的】探讨兔关节软骨细胞的分离、培养方法,观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况。【方法】无菌条件下,从2周龄新西兰白兔的颞颌关节及四肢关节髁突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨细胞,经台盼蓝拒染计数,将细胞按l×106个/孔接种于6孔培养板,传代培养,描绘生长曲线。利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态。应用甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定。【结果】每克软骨能获取1.5×106个软骨细胞,活性率为95%。培养2~3d,细胞贴壁、变形,呈多角形;8d左右,细胞融合成层。透射电镜观察显示细胞核圆形,有丰富的粗面内质网、高尔基体及分泌的基质成分。甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性。细胞传至5代后,出现“成纤维细胞样”。【结论】本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第2代细胞生长良好,适合于实验研究;软骨细胞5代培养后,细胞表型发生改变。

关键词: 关节,, 软骨/, 细胞学, 细胞培养 软骨细胞/, 超微结构

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2006年10月27日

【期刊论文】兔关节软骨细胞在几丁糖中培养的生物学特性

张志光, 郑卫平, 郑有华, 杨国平

中山医科大学学报(Acad J SUMS),2000,21(4):277~279,-0001,():

摘要

【目的】观察关节软骨细胞在几丁糖凝胶中培养的生物学行为,以探讨几丁糖凝胶作为组织工程细胞支架的可行 性。【方法】从幼龄兔关节表面削取薄层软骨,经酶消化获得大量的软骨细胞。原代培养后,按106/mL细胞浓度接种于几丁糖凝胶,通过绘制生长曲线,组织化学检测,透射电镜观察,了解软骨细胞在几丁糖中生长特征。【结果】软骨细胞在几丁糖中保持圆形,甲苯胺蓝异染及Ⅱ型胶原免疫组化染色呈强阳性;细胞内富含高尔基体、粗面型内质网及大量的分泌泡。【结论】软骨细胞在几丁糖中保持圆形生长状态,几丁糖能促进软骨细胞分裂、增殖,提高其分泌基质的能力。几丁糖可作为可注射性软骨组织工程的载体材料。

关键词: 关节,, 软骨/, 细胞学, 几丁糖凝胶, 细胞培养 软骨细胞/, 超微结构

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