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2005年07月19日

【期刊论文】胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的实验研究

唐仕波, 邱观婷, 黄冰

中华医学杂志2000,12(80):936~938,-0001,():

摘要

目的探讨胚胎干细胞(ES)向神经细胞定向分化发育的可能性。方法ES2D3在无小鼠白血病抑制因子(mLIF)存在的条件下培养ES细胞4d,形成ES集落(即胚胎样小体),经胰酶消化打散后种植于粘附性培养皿上,再经全反视黄酸(RA)诱导4d。然后分别作免疫组织化学、RT2PCR检测,鉴定分化细胞的特征。结果上述细胞表达MAP22和GFAP蛋白。RT2PCR分析进一步证明这些细胞能表达γ2氨基丁酸(GABA)γ亚单位和酪氨酸羟化酶以及脑因子21神经相关基因。结论ES细胞在体外能有效地被诱导成具有多种神经元特性的神经样细胞,可为神经移植提供源源不断的材料。

关键词: 胚胎 干细胞, 细胞分化, 神经元

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2005年07月19日

【期刊论文】胚胎干细胞视网膜下移植实验研究初步报告

唐仕波, 邱观婷, 李加青, 卢凤荷

中华眼底病杂志2000,4(16):253~256,-0001,():

摘要

目的探讨胚胎干细胞(mbronic stem cell,ESC)视网膜下间隙分化发育的情况。方法ESC经体外悬浮培养4d形成胚胎体(embryonic body,EB)备作移植。将ESC以及EB联合或不联合视黄酸(retinoic acid,RA)分别移植到SD大鼠玻璃体腔或视网膜下,在视网膜下间隙移植眼,于移植前结扎眼动脉40s造成缺血再灌注损伤的实验模型。于移植后14~28d摘除眼球,观察移植物分化发育的情况。结果ESC在SD大鼠玻璃体腔内迅速增生,形成非典型性增生团块;EB在缺血再灌注损伤眼视网膜下间隙经RA诱导能定向分化为视网膜感光细胞;而在无RA作用下向多极化分化发育。单独RA视网膜下间隙注射后导致神经视网膜上皮增生变厚。结论ESC源性的EB在缺血再灌注眼视网膜下间隙经RA诱导能向视网膜感光细胞分化。

关键词: 干细胞, 细胞移植, 胚胎 视网膜变性 治疗

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2005年07月19日

【期刊论文】人胚眼视网膜光感受器细胞的体外培养和鉴定

唐仕波, 罗燕, 林少芬, 郑湖玲, 郑健, 黄强

中华眼科杂志2001,3(37):178~181,-0001,():

摘要

目的探讨人胚眼视网膜光感受器细胞的获取和体外培养方法,为进行人类视网膜光感受器细胞移植提供理论依据。方法采用酶分层消化法分离获取人胚眼纯视网膜光感受器细胞,使用视网膜色素上皮细胞的条件培养液,在体外长期培养并进行形态学鉴别;用苏木素2伊红染色显示消化后的视网膜组织结构层次,以确定所获取的视网膜光感受器细胞的纯度;用抗视杆细胞特异性视紫质蛋白抗体(rhodopsin4D2,Rho4D2)免疫细胞化学染色做细胞鉴定。结果 酶分层消化法能获取较纯的视网膜光感受器细胞,抗Rho4D2阳性,并能在体外存活较长时间。结论酶分层消化法所获取的人胚眼纯视网膜光感受器细胞能在体外较长时间存活,并可表达光感受器细胞特异性视紫质蛋白,将为人类视网膜光感受器细胞的移植和各种体外研究提供细胞来源。

关键词: 视网膜, 光感受器, 胚胎 体外研究, 细胞培养, 视紫质

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