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2006年11月03日

【期刊论文】体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为神经干细胞的实验研究*

葛坚, 陶靖, 葛坚△, 黄冰, 王智崇, 郭彦, 余克明, 陈慧怡, 陈系古

中国病理生理杂志,2003,19 (3): 289-292,-0001,():

摘要

目的:探讨体外诱导小鼠胚胎干细胞(ESCs)分化为神经干细胞(NSCs)的可能性。方法:ESCs经胚胎体阶段,以视黄酸及视网膜müller细胞诱导,在NSCs选择性培养基中筛选培养扩增7d,观察形态变化,采用RT-PCR法检测nestin、glutaminase、Brn-3基因表达及免疫细胞化学法检测nestin等NSCs特异性标志物,并对其扩增及分化能力进行观察。结果:ESCs经初级诱导,NSCs选择性培养基筛选培养7d后,形成大量神经球样结构,可扩增传代。绝大部分神经球样结构呈nestin抗原阳性,整合BrdU,表达nestin、glutaminase、Brn-3基因,且可分化为神经元及神经胶质样细胞。结论:视黄酸及müller细胞诱导的ESCs,经选择性培养基筛选培养可获得NSCs,有望为青光眼等神经变性疾病提供新的治疗途径。

关键词: 胚胎干细胞, 神经再生, 小鼠

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2005年07月19日

【期刊论文】胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的实验研究

唐仕波, 邱观婷, 黄冰

中华医学杂志2000,12(80):936~938,-0001,():

摘要

目的探讨胚胎干细胞(ES)向神经细胞定向分化发育的可能性。方法ES2D3在无小鼠白血病抑制因子(mLIF)存在的条件下培养ES细胞4d,形成ES集落(即胚胎样小体),经胰酶消化打散后种植于粘附性培养皿上,再经全反视黄酸(RA)诱导4d。然后分别作免疫组织化学、RT2PCR检测,鉴定分化细胞的特征。结果上述细胞表达MAP22和GFAP蛋白。RT2PCR分析进一步证明这些细胞能表达γ2氨基丁酸(GABA)γ亚单位和酪氨酸羟化酶以及脑因子21神经相关基因。结论ES细胞在体外能有效地被诱导成具有多种神经元特性的神经样细胞,可为神经移植提供源源不断的材料。

关键词: 胚胎 干细胞, 细胞分化, 神经元

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2005年07月22日

【期刊论文】角膜基质诱导胚胎干细胞定向分化的初步实验研究

王智崇, 陈家祺, 葛坚, 黄冰

,-0001,():

摘要

目的:探索角膜基质接触诱导ES细胞定向分化的可能性。方法:分别在去上皮的新西兰白兔表层角膜缘基质上、晶状体上皮细胞饲养层上培养ES-D3细胞,形成复层细胞后,行活体移植,用扫描电镜和光镜观察。结果:1.ES细胞在新鲜表层角膜缘基质上增殖缓慢,2~3周形成较大细胞集落,光镜下细胞形态单一,体积较正常ES细胞大,电镜下细胞核已演变为细长形,移植到裸鼠皮下2周形成细胞复层,电镜下可见微绒毛,而角膜基质非上皮面的ES细胞仍保持其小细胞状态不变。2.晶状体上皮细胞与ES细胞共培养只能延缓其分化时间,不能诱导其定向分化,复层细胞移植后的棉衣组化显示:AE5阳性表达。结论:表层角膜缘基质具有诱导ES细胞定向分化的潜能,体外培养条件下可能不发生晶状体诱导的第三级胚胎诱导。

关键词: 胚胎干细胞 角膜缘干细胞 胚胎诱导 基质 定向分化

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