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2011年05月03日

【期刊论文】2, 5-己二酮对大鼠脊髓组织蛋白激酶含量的影响

谢克勤, 王青山, 侯丽艳, 张翠丽, 宋福永, 朱振平

环境与健康杂志,2008,25(5):391~395,-0001,():

摘要

目的探讨蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)和细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)对2,5-己二酮(HD)中毒性周围神经病神经丝(NF)变化的作用。方法将30只体重为200~240g的SPF级雄性Wistar大鼠随机分为3组(1个对照组、2个染毒组),每组10只。经腹腔染毒HD,剂量分别为200和400mg/kg,每周染毒5d,每日1次,连续8周,建立HD中毒性神经病模型。对照组给予相同体积的生理盐水。利用SDS.PAGE和WesternBlotting方法检测脊髓胞浆蛋白和膜蛋白组分中PKA、PKC、P35前体和CDK5的相对含量。结果在脊髓胞浆蛋白组分中,与对照组比较,PKA和PKC含量在400mg/kg染毒组大鼠分别升高了46.1%和23.0%(P<0.01),而在200mg/kg染毒组均无明显改变(P>0.05);p35前体和CDK5在200mg/kg染毒组分别升高了56.8%(P<0.01)和78.2%(P<0.01),而在400mg/kg染毒组,仅CDK5升高了21.9%(P<0.01),p35前体含量无明显改变。在脊髓膜蛋白组分中,PKA和CDK5含量在200、400mg/kg染毒组大鼠分别升高了19.3%(P<0.01),25.5%(P<0.01)和26.3%(P<0.01),12.7%(P<0.01);PKC含量仅在400mg/kg染毒组升高了13.9%(P<0.01),而在200mg/kg染毒组无明显改变(P>0.05);染毒组p35前体与对照组比较,变化不明显(P>0.05)。结论HD使脊髓组织中PKA、PKC和CDK5含量明显升高,提示相关蛋白激酶含量的升高可能是HD中毒性周围神经病的发病机

关键词: 环境污染物, 2,, 5-己二酮 中毒性神经病, 蛋白激酶, 磷酸化

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2011年05月03日

【期刊论文】大蒜油拮抗2, 5-己二酮对大鼠神经组织的氧化损伤的效果

谢克勤, 高绪聪, 曾涛, 王倩, 王青山

中华劳动卫生职业病杂志,2008,26(11):649~653,-0001,():

摘要

目的探讨大蒜油对2,5-己二酮(2,5-hexanedione,2,5-HD)导致的大鼠神经组织氧化损伤的拮抗作用和对周围运动神经毒性的影响。方法Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组、人蒜油低、高剂量组,每组10只。模型组及大蒜油低、高剂量组分别给予2,5。HD300ms/ks腹腔注射,正常对照组给予生理盐水,5次/周,持续6周。大蒜油低、高剂量组提前1周分别给予40和80mg/kg大蒜油灌胃,持续至实验结束。测定后肢撑力指数和平衡指数等神经行为学指标,实验结束取脑、脊髓和坐骨神经分别测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱廿肽(GSH)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和抑制羟自由基能力。结果与第0周比较,后肢撑力指数第4周模型组升高44%,大蒜油低剂量组升高50%,大蒜油高剂茸组升高49%,但3组间差异无统计学意义(P>0.05);第4周模型组平衡指数降低30%,大蒜油低剂量组降低45%,大蒜油高剂量组降低68%,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。大蒜油低、高剂基组大鼠在第4周即出现运动异常,较模型组人鼠提前l周;各组步态评分,模型组,大蒜油低、高剂量组均明显高于对照组,且大蒜油高剂量组高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在大脑、脊髓和坐骨神经中,与正常对照组相比,模型组人鼠MDA含量升高,抑制羟自由基能力降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,大蒜油低、高剂最组在各神经组织中MDA含量均明显降低,抑制羟自由基能力明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论大蒜油可拮抗2,5-HD所致的大鼠神经组织氧化损伤,但并末改善2,5-HD导致的周围运动神经损伤,提示氧化-抗氧化损伤不是2,5-HD中毒性神经病的主要机制。

关键词: 大蒜油, 2,, 5-己二酮 毒性试验, 周围神经系统疾病

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2011年05月03日

【期刊论文】2, 5-HD对大鼠DRG神经元神经丝蛋白表达的影响

谢克勤, 王蓣

毒理学杂志,2008,22(4):275~279,-0001,():

摘要

目的比较2,5.己二酮(2,5-HD)和3,3'-亚氨基二丙腈(3,3'-IDPN)对大鼠DRG神经元神经丝蛋白(NF-M)的损伤作用。方法用出生后2d的大鼠背根神经节(DRG)神经元,在培养皿中加不同浓度的2,5-HD和3,3'-IDPN进行培养,用荧光染料测定细胞毒性,计算细胞死亡率。用蛋白免疫荧光方法测定NF-M,计算DRG神经元细胞体的神经丝表达。结果DRG神经元24h接触2,5-HD和3,3'-IDPN的LD。约为32和102mmol/L。DRG细胞体内的NF-M蛋白含量在接触2,5-HD(0、4、8和16mmolL浓度)24和48h后结果显示。各个剂量组均有明显降低(P<0.05,P<0.01);而在接触3,3'-IDPN24h后,各个剂量组之间没有发生明显改变,但在接触48h后,仅有64,128mmol/L组与对照相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在DRG神经元具有相同死亡率时,2,5-HD和3,3'-IDPN24h后对NF-M蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论2,5-HD与3。3'-IDPN对NF-M的损伤不同。2,5-HD减少NF-M蛋白表达要早于细胞死亡。NF-M对2,5-HD比对3,3'-IDPN敏感。

关键词: DRG神经元, 2,, 5-己二酮 中分子量神经丝, 3,, 3', -亚氨基二丙腈, 细胞培养

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2011年05月03日

【期刊论文】2, 5-己二酮诱导大鼠脊髓中神经丝含量变化的研究

谢克勤, 宋福永, 王青山, 曾涛, 于丽华, 朱振平

中华劳动卫生职业病杂志,2008,26(10):558~561,-0001,():

摘要

目的观察2,5-己二酮(2,5-HD)诱导大鼠脊髓中神经丝(NF)含量变化,以探讨正己烷中毒性神经病的分子机制。方法雄性Wistar大鼠70只随机分为0、2、4、8周对照组和2、4、8周染毒组,每组10只。经腹腔注射2,5-DH予染毒组动物,剂量为400mg/kg,建立正己烷中毒性神经病模型,对照组注射等最的盐水。利用步态评分评价大鼠周围神经病症状的进展,免疫印迹法(WesternBlotting)检测脊髓组织高、中和低相对分子质量神经丝(NF.H、NF-M和NF-L)含量的变化。结果HD染毒2周后,大鼠逐渐出现肌力降低、步态异常.瘫痪等表现,至染毒8周结束时大鼠呈现典型的中毒性周围神经病特征。随着2,5-HD染毒的进行,大鼠脊髓NF含量呈进行性下降。与8周对照组相比,2、4和8周染毒组大鼠脊髓上清中NF-H含最分别下降15.7%、57.0%和58.0%,NF.M含量分别下降36.0%、61.3%和65.2%,NF.L含量分别下降20.8%、43.9%和44.3%,差异均有统计学意义(P<0.01);在脊髓沉淀中,与0周对照组比较,染毒4、8周组NF.H含量分别下降35.6%和43.2%,NF.L含量分别下降26.4%和42.1%,差异均有统计学意义(P<0.01);2、4和8周染毒组大鼠脊髓沉淀中NF.M含量分别下降23-3%、33.9%和63.7%,差异有统计学意义(P<0.01o大鼠脊髓组织中NF.H、NF-M和NF.L含量与步态评分的复相关系数分别为0.8912,0.9282和0.8981,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论2,5.HD染毒诱导的脊髓组织中NF亚单位含量下降,可能是正己烷神经毒性的机制之一。

关键词: 2,, 5-己二酮 中毒性神经病, 周围神经系统疾病

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2011年05月03日

【期刊论文】小鼠血清中2, 5-己二酮含量的气相色谱测定

谢克勤, 高绪聪, 尹洪银

中华劳动卫生职业病杂志,2008,26(10):630~631,-0001,():

摘要

目的建立小鼠血清中2,5-己二酮(2,5-HD)的气相色谱测定方法。方法取小鼠血清0.3ml加O.03g无水K2CO3,加入乙酸乙酯1.2ml萃取30min后,进行气相色谱测定。结果血清中没有杂质干扰2.5-HD的测定。方法最低检出浓度为0.03μg/ml,线性范围0.03~80.00μg/ml;回收率83.8%~99.9%;日内相对标准偏差(RSD)3.3%~5.2%.日间(RSD)3.3%一8.0%。结论本方法准确可靠,具有良好的重现性,可用于小鼠血清中2,5-HD含量的测定。

关键词: 血清, 2,, 5-己二酮 色谱法,, 气相

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