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2006年12月09日

【期刊论文】N-糖酰胺酶F在大肠杆菌中的高效表达及其脱糖基化作用研究

祁庆生, 苏移山, 王圣钧, 王鹏, 祁庆生*

生物工程学报,2005,21(6):911~915,-0001,():

摘要

从脑膜炎脓杆菌(Flavobacterium meningosepticum)基因组中通过PCR扩增了N-糖酰胺酶F(PNGase F)基因,经酶切后与表达载体pET28a连接,获得的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)。重组大肠杆菌经诱导表达和纯化提取后,荻取大量高纯度N-糖酰胺酶F,其纯度达90%以上。试验证明,经纯化的重组N-糖酰胺酶F可以切除核糖核酸酶B、转铁蛋白和人IgG等糖蛋白上的N-糖链,具有脱糖基化作用。

关键词: N-糖酰胺酶F, PET28a, RNase B, 脱糖基化

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