目的 研究含内在核糖体进入位点（ ）的逆转录病毒双顺反子载体介导的醛脱氢酶基因（ALDH1）与多药耐药基因（mdr1)转导和共表达 方法 以携带ALDH1GN mdr1基因的重组逆转录病毒双顺反子 为载体，电穿孔法转导双嗜型包装细胞PA317，长春新碱筛选所 病毒生产细胞PA317/ 与 嗜包装细胞GP+E86乒乓感染提高病毒滴度；以重组病毒 转染R562细胞，应用聚合酶链反应（PCR）和Southem 检测转移基因的整合，流式细胞术（FCM）及 分析基因表达， 落培养法 定转导效率。结果 双嗜型病毒 清滴度达1.0×105rtu/ml 基因修饰细胞K562/ 经 和 证实双嗜基因稳定整合至基因组。对 氢过氧化环磷 按 及长春新碱 耐药 提高3～ 倍， FCM及集落法检测基因转导效率为62%～70%。结论 逆转录病毒IRES双顺反子载体能引导不同类型的耐药基因有效共表达，可用于扩大耐药范围，进行体内显性选择。

本文通过建立强区间空间概念，拓广了极大极小定理中线性及其它条件，获得了[2]-[5]等文中主要结果的统一形式。

目的：观察内在核糖体进入位点（IRES）控制多药耐药基因mdr1的表达能力。方法：以帽依赖性Ha mdr1载体为对照，利用pSXLC/pHa系统构建依赖脑心肌炎病毒IRES翻译的逆转录病毒载体HaIRES-mdr1(HaI mdr1),脂质体转染法导入鼠源泉包装细胞GP+E86并获得长春新碱耐药细胞；用聚合酶链反应（PCR）与流式细胞术（FCM）检测mdr1基因的转移与表达。结果：病毒生产细胞GP+E86/HaI mdr1上清中逆转录病毒的滴度为2.0×105cfu/ml,对长春新碱、柔红霉素与紫杉醇产生交叉耐药（24～52倍），而且具有多药耐药表型。PCR证实mdr1基因已稳定整合至GP+E86/HaI mdr1细胞基因组；FCM分析表明IRES能引导mdr1基因翻译成P-糖蛋白而高效表达，程序略低于Ha mdr1对照。结论：IRES可引导mdr1基因进行有效的帽非依赖性翻译，mdr1基因在双顺反子载体中可作为显性选择性基因用于基因治疗。