目的：研究丹酚酸A对培养的大鼠肝星状细胞增殖与胶原生成的影响。方法：用链酶蛋白酶与胶原酶对肝脏进行原位灌流消化，Nycodenz密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞，传一代培养。MTT法与[3H]TdR掺入法测定细胞增殖。丽春红染色、图象分析法半定量细胞胶原沉积量,ELISA法测定细胞培养上清中I型胶原分泌量，检测细胞层总蛋白量校正细胞数。RT-PCR法分析前胶原α2(I)基因的表达。结果：丹酚酸A 100μmol/L引起部分细胞脱壁与死亡，有一定毒性反应。丹酚酸A 0.1-10μmol/L对细胞形态无明显影响。丹酚酸A1-100μmol/L浓度依赖性抑制细胞增殖,降低胶原沉积量与I型胶原分泌量。丹酚酸A1-10μmol/L对前胶原α2(I)mRNA表达均有明显抑制作用。结论：丹酚酸A抑制肝星状细胞增殖与胶原表达，是丹参抗肝纤维化的主要有效成分之一，抑制肝星状细胞活化是其抗肝纤维化的主要作用机制。

目的 观察肝纤维化病理过程中肝脏Smads锚着蛋白(SARA)的表达变化及其与肝纤维化的关系。方法大鼠每kg体重10μl二甲基亚硝胺腹腔注射，1次/d，每周连续3 d，共4周，复制夫鼠肝纤维化模型。模型大鼠分别设首次造模后l、3 d、l、2、3、4周末，与造模停止后l、2、4周，共9个时间段为观察组。每组5～8只，另设正常大鼠10只为对照组。天狼猩红染色观察肝组织胶原沉积，盐酸水解法测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量，免疫组织化学染色观察肝组织SARA蛋白表达，Western blot法分析肝组织转化生长因子(TGF)β1、a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)和SARA蛋白的表达，并进行以上指标的相关性分析。结果随二甲基亚硝胺染毒持续，模型大鼠肝脏胶原增生(Hyp含量)与沉积增加，4周末时达到高峰，可见宽大纤维间隔与假小叶；而后随染毒停止，肝脏胶原沉积与纤维间隔有所减轻。模型组4、5、6、8周肝组织Hyp平均含量(μg/g)分别为193.0±39.2 188.5±39.9、174.4±21.2、163.6±31.5，对照组分别为125.6±19.5，f值在3.43～4.9，P值均<0.01。免疫组织化学染色发现，SARA主要表达于正常与纤维化肝脏的肝窦周围间质细胞，随肝纤维化发展SARA阳性染色细胞数量减少；随染毒停止与肝纤维化恢复，SARA渐恢复至正常组水平。Western blot发现，随肝纤维化形成，模型大鼠肝组织TGF β1、a-SMA蛋白表达逐渐增加．而SARA蛋白表达逐渐减少；肝纤维化恢复过程中，SARA渐恢复接近正常水平，TGF β1与a-SMA蛋白表达有所下降。在肝纤维化形成与恢复过程中，SARA蛋白与Hyp含量、TGFβ1与a-SMA表达均呈明显负相关。结论SARA蛋白主要表达于肝脏间质细胞；随大鼠肝纤维化发展，SARA表达减少；SARA蛋白与肝纤维化形成呈负相关关系。

目的：观察大鼠肺纤维化形成过程中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)-2/9的活性及其活性抑制物-基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase，TIMP)-1/2蛋白表达的动态变化，探讨肺纤维化形成过程中细胞外基质(extracellular matrix，ECM)降解的调控规律。方法：SD大鼠48只，随机分为模型组(30只)与正常对照组(18只)。模型组大鼠予以1次性气管内注射博来霉素诱导肺纤维化模型，正常对照组大鼠于气管内注入等量生理盐水。每组再各设1 d、3 d和1、2、3、4周共6个时间观察点，动态观察大鼠肺系数的变化。HE染色观察大鼠肺组织病理学的改变；Masson染色观察大鼠肺组织胶原沉积情况；Jamall氏法测定肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline，Hyp)的含量；Western印迹法分析肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达变化；明胶酶图法检测肺组织MMP-2与MMP-9的活性。结果：与正常对照组大鼠比较，模型组大鼠染毒后2周其肺组织发生局灶性病交，肺泡壁与间隔增厚，肺泡腔与间质内有大量炎细胞浸润，伴有少量成纤维细胞；肺系数明显增高；肺组织内Hyp含量稍升高；MMP-2/9蛋白的表达与活性增加，以活化型MMP-2增加更为明显；TIMP-1/2蛋白的表达则逐渐增加。模型组大鼠染毒后3～4周时，肺泡结构遭到破坏，部分肺泡腔塌陷消失，由胶原纤维和成纤维细胞占据，肺泡壁与间隔进一步增厚，形成严重的肺纤维化；肺系数较2周时有所下降，肺组织Hyp含量和TIMP-1/2蛋白的表达明显增加，至染毒后4周时最为明显；MMP-2/9活性较2周时有所下降，尤以活化型MMP-2的活性下降较为明显。结论：博来霉素诱导肺纤维化形成过程中，早期肺组织的病理学变化以肺泡炎症为主，肺组织内MMP-2/9活性增高；后期以纤维化为主，肺组织TIMP-1/2表达明显增加，MMP-2/9活性则有所下降。

目的：观察扶正化瘀方对大鼠中毒性。肾间质纤维化的作用。方法：Wistar大鼠40只，分为正常组、模型组、扶正化瘀方药物组。采用二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine，DMN)腹腔注射4周和含汞等重金属的饲料喂饲造模8周，制备大鼠肝纤维化-肾间质纤维化模型。药物组以扶正化瘀方自第5周起灌胃，1次/d，共4周。肾组织HE染色及六胺银(periodic acid-silver metheramine，PASM)染色，观察。肾组织炎症与胶原纤维沉积变化；试剂盒方法检测血清尿素氮与肌酐含量，观察肾功能变化；盐酸水解法测定肾组织羟脯氨酸(hydroxyproline，Hyp)含量，观察胶原生成变化。结果：模型大鼠肾小管上皮细胞浊肿、坏死与脱落，炎性细胞浸润；肾间质增宽，大量胶原沉积；肾小管基底膜增厚，出现皱褶；血清尿素氮与肌酐含量上升，肾组织Hyp含量显著增加。扶正化瘀方药物组明显减轻模型大鼠。肾小管炎症坏死与肾间质胶原沉积，减轻。肾组织Hyp含量，降低异常增高的血清尿素氮与肌酐水平。结论：DMN腹腔注射与汞等重金属饲料口服可造成大鼠肾间质纤维化，扶正化瘀方可明显改善大鼠肾功能，有抗肾间质纤维化的作用。

目的：观察扶正化瘀319方促进肝细胞白蛋白生成的机理度其拆方配伍意义。方法：胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞，原代培养。将扶正化瘀319方拆分为扶正组、化瘀组、虫草组、丹参组、虫草加丹参组，灌胃大鼠，制备各组药物血清，并作用于培养肝细胞。ELISA法测定培养上清白蛋白含量，并以细胞层总蛋白量校正细胞敷；RT-PCR法检测细胞前白蛋白原mRNA表达量。结果：药物血清对细胞形态无明显影响，对肝细胞白蛋白分泌及其前白蛋白原mRNA袁达均有不同程度的促进作用，其中以扶正化瘀319方全方作用最为显著，而拆方组、扶正组与化瘀组的作用分别优于其中的单味药组-虫草组与丹参组。结论：促进肝细胞白蛋白基因表达及其蛋白合成是扶正化瘀319方升高慢性肝病血清白蛋白水平的主要机理。在促进白蛋白生成作用中，扶正与化瘀药物组合应用较单一治法或药物有综合优势。