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2008年01月29日

【期刊论文】小鼠B淋巴瘤A20细胞株mCD99L2基因表达检测及真核表达载体构建

沈丽佳, 方唯意, 谢思明, 何滢, 蒋会勇, 赵彤

南方医科大学学报(J South Med Univ) 2006; 26(2),-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的检测及克隆小鼠B淋巴瘤A20细胞株mCD99L2基因,构建真核表达载体。方法设计寡核苷酸探针,应用原位分子杂交方法检测A20细胞中mCD99L2基因的mRNA表达,RT-PCR法从A20细胞总RNA中获取mCD99L2基因含编码区全长cDNA.克隆AT载体,筛选阳性克隆、酶切鉴定并经序列测定;设计含酶切位点的PCR引物,PCR获取含mCD99L2基因编码区片段,用限制性内切酶EcoR I和Xhol双酶切取所需目的片段,利用分子克隆技术与pcDNA3.1/MycHis C(+)质粒重组,对产生的重组子进行PCR双酶切鉴定,并经过测序证实。结果原位杂交方法检测A20细胞中mCD99L2基因mRNA呈阳性表达;RT-PCR法成功获得mCD99L2基因编码区全长cDNA序列,DNA序列测序结呆与GenBank提供的已知序列(NM_138309)比较,结果完全一致;重组质粒pcDNA3.1-mCD99L2中的插入片段经DNA测序后与GenBank中mD99L2基因相应序列比较.100%同源。结论小鼠B淋巴瘤A20细胞株存在mCD99L2基因,采用RT-PCR和T-A技术克隆了A20细胞的mCD99L2基因,成功构建了pcDNA3.1-mCD99L2真核表达载体,为下一步探索mCD99L2基因在小鼠B淋巴瘤A20细胞株中的功能奠定了实验基础。

淋巴瘤, A20细胞株, mCD99L2, 基因克隆, 真核表达载体

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2008年01月29日

【期刊论文】抑癌基因PTEN与PIP3、细胞周期蛋白D1在口腔鳞癌中的表达及其相关性分析

沈丽佳, 谢思明, 殷操, 阮萍, 姚希

中华口腔医学杂志2006年7月第41卷第7期/Chin J Stomatol, July 2006, Vol.41, No.7,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 通过检测口腔鳞癌及癌前病变中抑癌基因与张力蛋白同源10 q丢失的磷酸酶基因( PTEN)、3、4、5-三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达,分析其相关性,初步探讨在口腔鳞癌中PTEN可能的作用途径。方法采用免疫组化SP法检测63例口腔鳞癌、29例单纯增生、33例异常增生、25例正常口腔黏膜中PTEN、PIP3、cyclin D1的表达。结果PTEN在口腔鳞癌中阴性和弱阳性表达占25%,明显低于其他各组;PIP3在单纯增生、异常增生和口腔鳞癌中阳性或强阳性表达分别占66%、64%和76%,明显高于正常组的表达;cyclin D1在口腔鳞癌中阳性或强阳性表达的占49%,明显高于其他各组。PTEN与PIP3、cyclin D1之间呈负相关,PIP3写cyclin D1呈正相关。结论PTEN在口腔鳞癌的发生和发展过程中起着一定的作用;在口腔鳞癌中PTEN可通过下调PIP3,继而下调cyclin D1,从而抑制细胞的生长。

癌, 鳞状细胞;癌前病变;基因表达

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2008年01月29日

【期刊论文】mic27/CD99在经典型霍奇金淋巴瘤H/RS细胞中的表达及与Eber-1/LMP-1相关性的研究

沈丽佳, 何滢, 蒋会勇, 谢思明, 朱梅刚, 赵彤

中国病理生理杂志/Chinese Journal of Pathophysiology 2006, 22(4): 776 -780,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的:检测mic2基因与CD99蛋白和Eber-1基因与潜伏膜蛋白-1(LMP1)在经典型霍奇金淋巴瘤(cHL) H/RS细胞中的表达,探讨mic2/CD99表达与Eber-1/LMP-1的相关性。方法:采用分子原位杂交和免疫组化技术并结合组织芯片技术检测59例石蜡包埋淋巴瘤组织标本[43例cHL,16例非霍奇金淋巴瘤(NHL)] mic2/CD99和Eber-1/LMP-1的表达,比较分析mic2/CD99在两组中的表达及与Eber-1/LMP -1的关系。结果:cHL组CD99蛋白表达阳性率为2.3%,mic2基因表达为55.8%,LMP1袁达为58.1%,Eber-1表达为53.5%;NHL组CD99蛋白与mic2基因表达高于ChL组(P<0.05);LMP1和Eber -1的表达低于Chl组(P<0.05);mic2基因的表达高于CD99蛋白的表达(P<0.05);Eber -1与LMP1的表达无统计学意义(P>0.05)。CD99蛋白与LMP1的表达呈负相关(P<0.05),各项指标的表达与性别无关。CD99蛋白与LMP1的表达与年龄呈负相关(P<0.05),mic2与Eber -l的表达与年龄无关(P>0.05)。结论:CD99蛋白在从cHL H/RS细胞中低表达,并与LMP1的表达呈负相关。

霍奇金淋巴瘤;基因, mic2;基因, Eber-1;蛋白质CD99;潜伏膜蛋白质1

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2008年01月29日

【期刊论文】口腔扁平苔藓中Ispase-3,TNF-α和 TNFRI的表达及与细胞凋亡的关系

沈丽佳, 姚希, 殷操, 谢思明

第四军医大学学报(J Fourth Mil Med Univ)2006;27(7),-0001,():

-1年11月30日

摘要

AIM: To examine the expressions and distribution of Caspase-3, TNF-α and TNFRI and their relationship to apoptosis in oral lichen planus (OLP). METHODS: Immunohistochemical staining with SP method and TUNEL technique were used to detect the expressions of Caspase-3, TNF-α and TNFRI in 33 cases of OLP and 7 cases of normal oral mucosa specimens (the controls). RESULTS: Compared with the controls, OLP was increased in apoptosis index (AI) of epithelial cells and decreased in AI of lymphocytes (both P<0.05). The expression of Caspase-3 in all OLP cases was significantly higher than that in the normal group both in the epithelial layer and in the lamina propria (P<0.025). Compared with that in the normal group, TNF-α expression in all OLP cases was decreased in the epithelial layer and increased in the lamina propria (both P<0.025), while TNFRI expression was increased in the epithelial layer and decreased in the lamina propria in all OLP cases(both P <0.025). TNF-α expression was significantly increased in the lamina propria in the erosion group compared with the non-erosion group (P<0.05). A positive correlation was observed between Caspase-3 expression and AI in the epithelial cells(r=0.631, P<0.05). However, there was no significant correlation between Caspase-3 expression and AI in lymphocytes (P >0.05). Expressions of TNF-α and TNFR1 were significantly correlated to AI both in the epithelial layer and in the lamina propria. CONCLUSION: The accelerated apoptosis of keratinocytes and the inhibition of lymphocyte apoptosis may coexist in OLP, which may contribute to the form ation and progression of OLP.

lichen planus,, oral, Caspase-3, tumor necrosis factor, TNFRI, apoptosis

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2008年01月29日

【期刊论文】口腔扁平苔藓中 Caspase-3和PTEN蛋 白的免疫组织化学观察

沈丽佳, 姚希, 吴颜晖, 殷操, 谢思明

暨南大学学报(医学版)2005年12月第 26卷第 6期/Journal of Jinan University (Medicine Edition) Vol.26, No.6, Dec.2006 ,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的:探讨 Caspase-3和 FIEN蛋白在口腔扁平苔藓病变发生发展中的作用及两者间的关系。方法:采用 S-P免疫组化方法对 28例口腔扁平苔藓及 5例正常口腔黏膜中 caspase-3 和 FIEN蛋白表达进行检测。结果:口腔扁平苔藓病损中 Caspase-3的阳性率上皮层和固有层均为100%,与正常口腔黏膜相比,表达有显著统计学意义(P<0.01)。口腔扁平苔藓病损中FI'EN蛋白阳性率为100%,与正常口腔黏膜相比,无统计学差异(P>0.05)。口腔扁平苔藓中caspae-3与 FI'EN蛋白表达呈正相关,(P<0.05)。结论:Caspase-3和 FI'EN蛋白均参与口腔扁平苔藓病变的发生及发展过程,且两者之间具有相关性。

口腔扁平苔藓, 免疫组织化学, caspase-3蛋白, FIEN蛋白

合作学者

  • 沈丽佳 邀请

    暨南大学,广东

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