中国科技论文在线

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2010年12月07日

王嘉福， SupatATTATHOM

，-0001，（）：

-1年11月30日

重组质粒psC66d（Cry IAb601）转化大肠杆菌DH5a后，接种TCB培养基，经SDSPAGE电泳和电镜分析，晶胞蛋白基因在大肠杆菌细胞中得到高效表达，表达产物分子量约130KD，在细菌细胞中形成卵圆形包涵体。比较了重组菌株在不同培养基中的生长及晶胞蛋白的表达水平，结果说明重组茵株在IB及2×YT培养基中的生长及表达均较低，在TcB培养基中细菌生长良好，晶胞蛋白高效表达，表达量可达细菌总蛋白的63.4%，较出发菌株GH9601增加17.8倍。测定了纯化的晶胞蛋白对4种鳞翅目昆虫的杀虫活性。

苏芸金杆茵，重组DNA，杀虫晶胞蛋白，表达

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2010年12月07日

【期刊论文】贵州竹乡乌骨鸡Ghrelin基因的克隆及原核表达水

王嘉福，代新兰.，冉雪琴，王嘉福.**

China Poultru Vol.30 No.72008，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

采用特异性引物自贵州黑羽乌骨鸡胃部组织克隆了Ghrelin的基因，基因全长12330bp，含有4个外显子，3个内含子。采用RT—PcR技术，获得了Ghrelin cDNA版式段（563bp），Il序列分析推测，通过可变剪切可产生两mRNA，cDNA编码区与基因组中的编码区完全一致。黑羽乌骨鸡Ghrelin基因与已知鸡种比较有13～18个碱基不同，相似性为99.1～99/3%，但其氨基酸序列完全一样，表明禽类 Ghrelin。多肽高度保守。将其 Ghrehn编码区亚克隆到原II核表达载44kpTYBll中，经序列测定碱基序列正确，获得重组质：pTYBll/G。在IPTG的诱导下，重组质粒在大肠杆菌ER2566中获得表达。当ODm=0.5，IPTG浓度1mmol/L，诱导5小l时的表达量最高，融合蛋白占细胞总蛋白40%。采用几质结合的预装柱对表达产物进行l纯化，产率约为5 mg/L培养液。

乌骨鸡， Ghrelin基因，原核表达

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2010年12月07日

【期刊论文】贵州白山羊GDF9基因外显子2的多态性研究

王嘉福，杜智勇，林尖兵，覃成，冉雪琴*

Animal Husbandry & Velerinary Medicine 2008 Vol.40 No.4，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

生长分化因子9（GDF9）是卵母细胞分泌的生长因子，对早期卵泡的生长和分化起重要的调节作用。采用RFJP和sscP方法检测贵州白山羊GD，9基因外显子2的单核苷酸多态性，结果表明：在所有检测样本中均未发现GDF9基因的FecGh突变；在高繁殖率（3羔以上/胎）母羊和公羊中检测到8个杂合的AB基因型，其中5个为高产的母羊，3个为公羊。碱基序列分析证实GD丹基因编码区第1 189 bp位点的碱基由G突变为A，该位点位于外显子2中，导致活性肽第79位缬氨酸突变为异亮氨酸（V79I）。但在低繁殖率（1—2羔/胎）母羊中没有发现该突变。虽然贵州白山羊GDF9基因中G1189A突变的发生率仅为5%，但该位点编码的氨基酸与FecGh突变（s77F）仅相隔1个氨基酸，因此推测GD冈基因中的G1189A突变可能与贵州白山羊的高繁殖力有关。

贵州白山羊， GDF9基因， RFLP， sscP， FecGh

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2010年12月07日

【期刊论文】贵州白山羊BMPl5基因多态性研究

王嘉福，林尖兵，杜智勇，覃成，冉雪琴*

，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

骨形态发生蛋白15（bone m0Iphogenetic pmlein 15，BMPl5）基因是控制Belclare和carIlbridge等绵羊的高繁殖力主效基因，BMPl5蛋白中单个氨基酸的改变直接影响绵羊的产卵率和产羔数。采用RFLP和SsCP技术检测BMPl5基因中绵羊高繁殖力突变类型FecXc和FecXc在贵州白山羊中的分布。结果表明，在贵州白山羊样品中没有检测到BMPl5基因的FecXc突变，说明该突变在贵州白山羊中的自然发生率非常低；在贵州白山羊高产母羊和公羊中检测到BMPl5的FecXb突变，以杂合的AB基因型存在，低产母羊中没有检测到该突变，提示BMPl5基因的Fecxb突变可能是影响贵州白山羊繁殖力的因素之一。

贵州白山羊，繁殖力， BMP15基因