目的 观察融合蛋白CAC（HBcAg与β-淀粉样肽基因重组的原核表达产物）免疫的小鼠血清对β-淀粉样肽（Aβ）纤维形成的抑制作用。方法 用融合蛋白CAC免疫BALB/C小鼠，通过ELISA方法检测其血清中抗-Aβ抗体的滴度。当滴度大于1:10000时，经小鼠眼球采血分离血清。以不同稀释度的血清与终浓度为0.5mg/ml的Aβ混合，37℃孵育（老化）5d后，透射电镜观察Aβ的聚集和纤维形成。结果 融合蛋白免疫3次后，小鼠血清中抗-Aβ抗体的滴度达到了1：16000。电镜观察可见，加未免疫的对照鼠血清时，经过5d的老化，Aβ聚集成空心管状纤维，纤维密集，呈网状，几乎充斥于整个视野。当加入稀释度为1：2000的高滴度免疫血清时，开始出现明显的抑制作用，随着血清浓度的增加，形成的Aβ纤维逐渐减少；到1:500时，镜下见不到Aβ纤维的存在。结论 CAC免疫的小鼠血清可抑制Aβ的纤维形成。

目的 研究β-淀粉样肽（β-amyloidpeptied，Aβ）与乙型肝炎核心抗原（HBcAg）融合基因Aβ-HBcAg的原核表达，检测融合蛋白的免疫反应性及免疫原性。方法 将重组质粒pBv220/Aβ-HBcAg转化大肠杆菌DH5d，温控表达，超声破碎细菌，通过SDS-PAGE、考马斯亮蓝染色和EusA等方法，观察Aβ-HBcAg的表达及融合蛋白的免疫反应性；用融合蛋白免疫Balh/c小鼠，ELISA法检测血清中的抗-Aβ抗体和抗-HBc抗体滴度。结果 融合蛋白以包涵体的形式存在于沉淀中，表达量为菌体沉淀的5%，融合蛋白既有AB的免疫反应性，又有HBcAg的免疫反应性。Balb/c小鼠经过3次免疫后，血清中的抗体滴度很低，继续强化免疫2次后，血清中抗-Aβ抗体滴度、抗-HBc抗体滴度分别上升为l：800和l：3200。结论 融合基因Aβ-HBcAg可在大肠杆菌DH5a中表达，表达蛋白有一定的免疫反应性和免疫原性，但表达量较低，免疫反应性和免疫原性较弱。提示融合基因Aβ-HBcAg的表达量和融合蛋白免疫原性的提高尚需进一步研究。

目的 探讨重组腺伴随病毒载体表达人脑源性神经营养因子（hBDNF）对大鼠基底前脑胆碱能神经元损伤的保护作用。方法 用β淀粉样肽（Aβ25-35）注入大鼠Meynert核损伤胆碱能神经元。损伤后8-10d行hBDNF重组腺伴随病毒脑内注射。经避暗回避试验测试大鼠学习记忆能力#组织学及免疫组织化学观察hBDNF表达以及胆碱能神经元数量变化。结果 避暗回避试验结果显示，应用hBDNF重组腺伴随病毒4周后，实验组动物的学习记忆能力增强，行为明显改善。胆碱乙酰转移酶（ChAT）免疫组织化学染色显示，注射点附近免疫反应阳性神经元散在或成群分布，数目明显增多，经与模型组比较，胆碱能神经元数量增高约37%。结论 hBDNF重组腺伴随病毒可在脑内表达hBDNF表达的hBDNF对损伤的胆碱能神经元具有营养和保护作用。

目的 构建β-淀粉样肽（β-amyloidpeptied，Aβ）与乙肝核心抗原（HBcAg）融合基因Aβ-HBcAg的原核表达载体pBv220/Aβ-HBcAg，为阿尔茨海默病基因工程疫苗的研究和制备奠定基础。方法 采用非对称互补引物/模板法，制备两端含有酶切位点的Aβl-42肽的cDNA，将其连接到删除了Pre-C区的HBcAg亚型ayw基因的N端组成融合基因Aβ-HBcAg，再将该融合基因亚克隆于载体pBV220，构建为原核表达载体pBV220/AβHBcAg。结果 经DNA测序，限制性内切酶酶切等方法证实已成功地将Aβl-42cDNA重组到HBvcore的N端，并将融合基因亚克隆于pBV220内。结论 成功构建了原核表达载体pBv220/Aβ-HBcAg。

目的：研究β-淀粉样肽（AB）与HBcAg的融合基AB--HBcAg的原核表达，并检测表达的融合蛋白AB-HBcAg的免疫原性。方法：从重组质粒7Z/A3-HBcAg中，切下含Aβ-HBcAg的基因片段，将其融合于质粒pYTA1的lac启动子之后，构建重组表达质粒pYTA/AB-HBcAg。以此重组质粒转化大肠杆菌DHSa，在IPTG诱导下表达。超声破碎表达的细菌，通过SDS-PAGE及考马斯亮蓝染色，检测融合蛋白。MB-HBcAg的表达。采用EusA法检测融合蛋白的反应原性。融合蛋白经饱和硫酸铵盐析法分离和纯化后免疫BALB/c小鼠，用ELISA法检测血清中抗-AB抗体的滴度。结果：融合蛋白以可溶性形式存在于细菌裂解液的上清中，其表达量为菌体总蛋白量的7%。表达的融合蛋白既有AB的反应原性，又有与HB-cAg的反应原性。经3次免疫后，BALB/c小鼠血清中抗-AB抗体的滴度最高可为1：16000。结论：融合基因AB-HBcAg可在大肠杆菌DH5a中表达。表达产物为可溶性蛋白，存在于细菌裂解液的上清中，具有较强的免疫原性。本研究为正在进行的AD基因工程疫苗的动物实验打下了基础。