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2005年05月28日

【期刊论文】家蚕胚胎发育时期的RNA干涉研究*

夏庆友, 刘春, 帅小蓉, 程廷才, 徐汉福, 李春峰, 代方银, 夏庆友*, *, 向仲怀

生物化学与生物物理进展,2004,31(4):322~327,-0001,():

-1年11月30日

摘要

通过导入特定基因的dsRNA特异性地关闭该基因的功能,由此产生的现象为RNA干涉。为在家蚕胚胎发育时期建立有效的RNAi技术体系,在前人的基础上以家蚕第三白卵基因Bmuh3为材料,建立了有效的RNAi技术体系,结果表明,成功诱导第三白卵突变表型的有效注射时间为产卵后8h内,wh3dsRNA的有效浓度须大于2.0g/L。在发育胚胎的第三天注射wh3dsRNA,同样可诱导第三白卵突变的另一表型——半透明蚁蚕,根据实验结果初步推测,Bmwh3不仅参与眼色素和卵浆液膜色素前体的转运,还可能参与胚胎体壁色素前体的转运。

RNA干涉,, 家蚕,, Bmwh3基因,, 第三白卵突变

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2005年05月28日

【期刊论文】家蚕母性基因的表达序列标签分析

夏庆友, 邱咏梅, 夏庆友*, 程道军, 沈以红, 刘春, 林英, 查幸福, 向仲怀

昆虫学报,2004,47(2):159-165,-0001,():

-1年11月30日

摘要

为了研究家蚕Bombyx mori卵中储存的母性遗传信息,以未受精的肾脏型和正常型蚕卵为材料构建了cDNA文库,并对其随机测序,共获得391条表达序列标签(EST)序列,经拼接后得到374条非重复序列。生物信息学分析发现,172个非重复序列与国际数据库GenBank和silkbase中的已知基因具有较高的相似性。除3个已知母性基因外,其余主要与DNA复制、能量代谢、信号转导、转录、蛋白质结构以及胚胎发育中个体形成等相关:该结果可为进一步研究家蚕胚胎早期发育的调控提供基础数据。

家蚕, 表达序列标签, 未受精卵, 胚胎发育, 母性基因

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2005年05月28日

【期刊论文】家蚕卵黄原蛋白及其受体基因*

夏庆友, LIN Ying, ZHAO Ping, HOU Yong, LI Juan, GONG Da-Ping, SUN Quan, XIA Qing-You *, *, XIANG Zhong-Huai

动物学报,51(1):117~125,-0001,():

-1年11月30日

摘要

家蚕小卵突变体(Small egg mutant,sm),其卵体积仅及正常卵的2/3,不能受精而致死。因其卵母细胞不能正常吸收卵黄原蛋白(Vg),人们认为其原因可能是卵黄原蛋白受体基因(VgR)突变所致。本研究首先通过克隆筛选和基因组序列分析,获得了2564 bp含有pbvA的家蚕卵黄原蛋白受体基因(BmVgR)片段。将该基因片段的预测蛋白与其它物种的VgR/YPR和低密度脂蛋白受体(LDLR)家族比较,发现该基因具有LDLR家族的基本结构特征。其次,经RT-ECR检测,结果表明BmVgR在sm的不同时期的卵母细胞中都能正常转录。最后,分别对sm不同发育时期的体液和卵的总蛋白进行SDSPAGE分析,发现该突变体的卵母细胞不能正常摄取体液蛋白(包括Vg)。综合分析,sm不能正常摄取Vg,可能并不是VgR的功能异常导致,而是与滤泡细胞异常有关

家蚕, 小卵突变体, 卵黄原蛋白受体, 卵黄原蛋白, 低密度脂蛋白受体

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2005年05月28日

【期刊论文】家蚕不同品种与个体的血液胰凝乳蛋白酶抑制剂差异研究

夏庆友, 赵萍, 藤井博, 伴野丰

蚕业科学,2003,29(4):349~354,-0001,():

-1年11月30日

摘要

胰凝乳蛋白酶抑制剂(Chymotrypsin inhibitor,CI)是家蚕血液中主要的蛋白酶抑制因子,为其正常生长发育所不可缺少,研究a对阐明家蚕正常生理以及害虫防治等都具有重要意义。采用pH8.3、4.0聚丙烯酰胺凝胶电泳和CI活性染色法,对6个家蚕品种血液中的蛋白质含量和CI活性进行了测定,并对各品种CI活性的个体差异性进行了分析。结果表明:结合pH 8.3和pH4.O的电泳条件,可检测出Ict-D,Ict-E,Ict-A,Ict-B,Ict-H基因所支配的15种CI;6个品种中有3个具有CI个体差异性,而且Ict-E和Ict-B在有的品种或个体无活性,为非必需种类。

家蚕, 血液, 胰凝乳蛋白酶抑制剂, 比活性, 个体差异

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2005年05月28日

【期刊论文】siRNA介导的家蚕ABC转运蛋白相关基因的干涉研究

夏庆友, 王根洪, 刘春, 侯勇, 李娟, 赵萍

,-0001,():

-1年11月30日

摘要

由siRNA(short interfering RNAs)介导的RNAi作为一种工具已被广泛用于基因功能研究中,并有望在不久的将来成为防治生物体疾病的强大工具。本研究通过显微注射,在家蚕中首次以siRNA介导的方式,对家蚕ABC 转运蛋白(ATP Binding Cassette Transporter)系列相关基因(Bmwh1,Bmwh2,Bmwh3)进行了siRNA干涉研究,在部分基因中得到了高效特异的干涉现象。比较分析结果初步证实siRNA正义链3’碱基错配可以增强siRNA的干涉效果。同时,实验显示了siRNA较之于dsRNA介导的RNAi具有较强的优势,表明siRNA介导的RNAi可作为基因功能分析和未来的基因操作手段在家蚕中进行应用。

siRNA, RNAi, ABC, 转运蛋白, 显微注射

合作学者

  • 夏庆友 邀请

    西南农业大学,重庆

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