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2005年03月31日

【期刊论文】薄层层析和反相高效液相色谱检测木瓜蛋白酶催化合成的Aspartame及其中fsl产物

姚文兵，吴梧桐，许激扬，金生浩，严悦日，李康乐

药物生物技术，1994，1（2）：9～12，-0001，（）：

-1年11月30日

本文报道以TLc和HPLc法检测以木瓜蛋白酶在水一乙酸乙酯两相反应体系中合成的Aspartame及其中间产物（I）（I）。TLC条件为：展开剂（正丁醇：冰醋酸：水=3：l：1），展开时间（4～5h），检测（荧光检测253.7rim，l％茚三酮丙酮溶液显色）。HPLC条件为：流动相（乙腈：水=45：55），流速lml/min，检测（紫外检测260nm）。进样量20ul，灵敏度6，纸速l～4mm/mjn，分析周期lOmin。该方法简便、准确、灵敏度高。用该方法也证实以木瓜蛋白酶催化合成的Aspartame及其中间产物（I）与以嗜热蛋白酶（Tlnermolysin）催化合成的Aspartame及其中间产物（cbz-Asp-PIleOMe）完全一致。

阿巴斯甜(， Aspartame)，，木瓜蛋白酶: HPLc， cbz-Asp-pJaeOMe

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2005年03月31日

【期刊论文】聚乙二醇修饰干扰素A2b抗肿瘤细胞增殖作用

姚文兵，杨晓兵，吴梧桐，沈子龙

Jou rnal of Ch ina Pharm aceu t icalU n iversity　2002, 33 (4) : 348～350，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的研究基因工程干扰素A2b和聚乙二醇（PEG）修饰干扰素A2b的抗肿瘤细胞增殖效应。方法采用MTT 法将不同浓度的干扰素分别对几种肿瘤细胞进行生长抑制实验。结果　不同终浓度（500ng/m l,50ng/m l,5ng/m l, 0.5ng/m l）干扰素A2b和PEG修饰干扰素A2b对人肝癌细胞（SMMC-7721）、人红白血病细胞（K562）、人宫颈癌细胞（HeL a）、人鼻咽癌细胞（KB）和人胃癌细胞（BGC）的生长均有不同程度的抑制作用。结论聚乙二醇修饰干扰素的抗肿瘤细胞增殖作用优于干扰素。

干扰素，抗肿瘤，抗增殖，聚乙二醇

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2005年03月31日

【期刊论文】聚乙二醇修饰干扰素A2b的分离纯化和制备

姚文兵，许敏*，吴梧桐，沈子龙

Jou rnal of Ch ina Pharm aceu t icalU n iversity　2001, 32 (3) : 310～312，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的建立聚乙二醇修饰干扰素A2b的分离纯化方法。方法运用Superdex 75 H igh load制备型凝胶色谱柱, 以含0.15mol/LNaCl 的0.01mol/L磷酸盐缓冲液进行洗脱, 流速为1.5ml/min，检测波长为215nm。结果各洗脱组分经SDS-PAGE检测呈单一条带。聚乙二醇修饰干扰素A2b的蛋白回收率为36.5%，抗病毒活性回收率为4.3%，比活度为4.74×107IU/mg，是原形干扰素A2b的10.4%。结论这种方法可以用于制备聚乙二醇修饰干扰素A2b。

干扰素A2b，聚乙二醇修饰干扰素A2b，分离纯化

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2005年03月31日

【期刊论文】重组人干扰素a-2b工程菌的培养与发酵条件的优化研究

姚文兵，许敏*，吴梧桐，沈子龙

Journqal of China Pharmaceutical University 2000,31(6): 462～465，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

用均匀设计法对重组人干扰素“2b基因程菌的摇瓶发酵条件进行了优化，确定摇瓶培养基组成为：每升含蛋白胨10g、葡萄糖6g、酵母粉5g、Na2HPo46g、KH2Po42g、NH4Cl O.8g、NaCl 4g、CaCl2O.01g、Mgso4O.2g，发酵表达条件为：pH 6.9，温度37℃，IPTG诱导后表达时间为5h左右，装料量为20％。三批小试结果为：湿菌体平均产率18g/L，生物活性3.93×108Iu/L。发酵罐三批中试放大试验，湿菌体平均产率为29g/L，生物活性为6 68×108Iu/L发酵液。

重组人干扰素a-2b，基因表达，发酵条件

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2005年03月31日

【期刊论文】重组人干扰素α2b表达与分离纯化研究

姚文兵，姚文兵*，许敏，吴梧桐，沈子龙

中国药科大学学报，2001，32（2）：152～154，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的从湿菌体中分离纯化重组人干扰素α2b。方法采用（NH4）2SO4盐析2H3PO4处理2CM32离子交换层析2DE52离子交换层析2Sephadex G100凝胶层析等非亲和层析纯化方法。结果回收率约为30%，HPLC检验纯度达96%，每毫克蛋白比活力达1. 66×108 IU。结论分离纯化系统令人满意，回收率较高。

重组人干扰素α2b，分离，纯化，鉴定

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