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【期刊论文】应用FISH技术对肝癌细胞系HCC-9903X染色体变异的研究
王占民, 刘军, 郑淑芳, 李东华, 吴小鹏, 马道新, 李昭晖, 刘博, 赵志伦, 柯扬
中华普通外科杂志,2003,18(2):105~106,-0001,():
-1年11月30日
目的 研究人肝细胞肝癌细胞系HCC-9903 X染色体畸变规律。方法 建立肝细胞肝癌细胞系HCC-9903,制备其染色体标本,用X染色体着丝粒特异DNA 探针,对其X染色体进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FLSH)检测X染色体拷贝数畸变。结果 HCC-9903肝癌细胞系染色体变异发生率高,其中X染色体改变存在规律,拷贝数增多,以4拷贝为主,X染色体扩增率达99%。结论 X染色体拷贝数增多在肝癌细胞系中发生频率很高,证明在肝癌发病及发展过程中起到某种作用,其意义值得进一步探讨。
癌,, 肝细胞, X染色体, 原位杂交,, 荧光
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王占民, 张百萌, 余可克, 吴少蜂, 李勇
中华普通外科杂志,2003,18(6):379,-0001,():
-1年11月30日
本研究探讨内皮素(ET)对肝脏循环的影响与ETα和Tβ两种受体在这种调节过程中的作用。
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王占民, 吴小鹏, 刘博, 刘军, 高英茂, 李兆亭, 刘春生
中华外科杂志,2002,40(8):616~618,-0001,():
-1年11月30日
目的 介绍外生型肝癌细胞系的建立及对其生物学特性进行研究。方法 将手术切除的肿瘤标本进行体外培养,观察肝癌细胞形态学改变、核型分析、增殖动力学、流式细胞计数、裸鼠成瘤情况及AFP测定。结果 外生型肝癌细胞系(EGCH-9901)无论形态学观察,还是功能学测定,均符合肝癌细胞的特征,染色体众数76~104条,并具有体外高分泌AFP功能。 其特有表现为:呈克隆样生长,高密度时细胞呈重迭生长,肝癌细胞之间形成完整毛细胆管,内有明显微绒毛,细胞倍增时间较长。结论 EGHC-9901细胞系符合外生型肝癌细胞系的特征。
癌,, 肝细胞, 肿瘤细胞,, 培养的
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【期刊论文】人肝细胞癌细胞系HCC-9903的建立及其生物学特性研究
王占民, 刘军, 刘博, 吴小鹏, 高英茂, 刘春生
中华外科杂志,2001,39(11):872~875,-0001,():
-1年11月30日
目的 新建1株人体肝细胞肝癌细胞系,为肝癌研究提供新的、理想的实验模型,方法 以手术切除肝癌标本作原代培养,建立细胞系。通过光镜、电镜、倍增时间、生长曲线、双层软琼脂培养、流式细胞仪、染色体分析、刀豆球蛋白凝集试验、裸鼠接种、AFP、HBV及端粒酶检测
肝肿瘤,, 实验性, 肿瘤细胞,, 培养的, 组织培养
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【期刊论文】双自杀基因CD、HS V-tk共表达对肝门部胆管癌细胞杀伤作用实验研究
王占民, 李志伟, 吴小鹏, 刘春生, 马道新, 刘博
中国现代普通外科进展,2004,7(1):19~22,-0001,():
-1年11月30日
目的:观察逆转录病毒介导的双自杀基因CD、HS V-tk共表达对肝门部胆管癌细胞FRH的杀伤作用,探讨肝门部胆管癌的基因治疗方法。方法:在脂质体Lipofectamine的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PwzlneoCDglytk转导入包装细胞PA317,经G418筛选后培养产病毒的阳性克隆PA317/CD+tk细胞株,收集其病毒上清,转染FRH细胞,再次经G418筛选,获得稳定表达双自杀基因的FRH/CD+tk细胞株,用RT-PCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-flourocytosine, 5-Fc)和/或无环鸟苷(Ganciciovir, GCV)后,用MTT法测定转基因组及未转基因组FRH细胞的存活率。结果:双自杀基因在FRH细胞中可稳定表达,联合使用5-Fc和GCV对靶细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用5-Fc或GVC。结论:逆转录病毒介导自杀基因可有效杀死肝门部胆管癌细胞,双自杀基因共表达较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用。
逆转录病毒科·自杀基因·胆管肿瘤·基因疗法
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