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2004年12月29日

王占民，刘军，郑淑芳，李东华，吴小鹏，马道新，李昭晖，刘博，赵志伦，柯扬

中华普通外科杂志，2003，18（2）：105～106，-0001，（）：

-1年11月30日

目的研究人肝细胞肝癌细胞系HCC-9903 X染色体畸变规律。方法建立肝细胞肝癌细胞系HCC-9903，制备其染色体标本，用X染色体着丝粒特异DNA 探针，对其X染色体进行荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization, FLSH）检测X染色体拷贝数畸变。结果 HCC-9903肝癌细胞系染色体变异发生率高，其中X染色体改变存在规律，拷贝数增多，以4拷贝为主，X染色体扩增率达99%。结论 X染色体拷贝数增多在肝癌细胞系中发生频率很高，证明在肝癌发病及发展过程中起到某种作用，其意义值得进一步探讨。

癌,，肝细胞， X染色体，原位杂交,，荧光

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2004年12月29日

【期刊论文】内皮素1诱导肝脏血管收缩的受体研究

王占民，张百萌，余可克，吴少蜂，李勇

中华普通外科杂志，2003，18（6）：379，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

本研究探讨内皮素（ET）对肝脏循环的影响与ETα和Tβ两种受体在这种调节过程中的作用。

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2004年12月29日

【期刊论文】外生型肝癌细胞系的建立及生物学特性研究

王占民，吴小鹏，刘博，刘军，高英茂，李兆亭，刘春生

中华外科杂志，2002，40（8）：616～618，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的介绍外生型肝癌细胞系的建立及对其生物学特性进行研究。方法将手术切除的肿瘤标本进行体外培养，观察肝癌细胞形态学改变、核型分析、增殖动力学、流式细胞计数、裸鼠成瘤情况及AFP测定。结果外生型肝癌细胞系（EGCH-9901）无论形态学观察，还是功能学测定，均符合肝癌细胞的特征，染色体众数76～104条，并具有体外高分泌AFP功能。其特有表现为：呈克隆样生长，高密度时细胞呈重迭生长，肝癌细胞之间形成完整毛细胆管，内有明显微绒毛，细胞倍增时间较长。结论 EGHC-9901细胞系符合外生型肝癌细胞系的特征。

癌,，肝细胞，肿瘤细胞,，培养的

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2004年12月29日

【期刊论文】人肝细胞癌细胞系HCC-9903的建立及其生物学特性研究

王占民，刘军，刘博，吴小鹏，高英茂，刘春生

中华外科杂志，2001，39（11）：872～875，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的新建1株人体肝细胞肝癌细胞系，为肝癌研究提供新的、理想的实验模型，方法以手术切除肝癌标本作原代培养，建立细胞系。通过光镜、电镜、倍增时间、生长曲线、双层软琼脂培养、流式细胞仪、染色体分析、刀豆球蛋白凝集试验、裸鼠接种、AFP、HBV及端粒酶检测

肝肿瘤,，实验性，肿瘤细胞,，培养的，组织培养

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2004年12月29日

【期刊论文】双自杀基因CD、HS V-tk共表达对肝门部胆管癌细胞杀伤作用实验研究

王占民，李志伟，吴小鹏，刘春生，马道新，刘博

中国现代普通外科进展，2004，7（1）：19～22，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：观察逆转录病毒介导的双自杀基因CD、HS V-tk共表达对肝门部胆管癌细胞FRH的杀伤作用，探讨肝门部胆管癌的基因治疗方法。方法：在脂质体Lipofectamine的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PwzlneoCDglytk转导入包装细胞PA317，经G418筛选后培养产病毒的阳性克隆PA317/CD+tk细胞株，收集其病毒上清，转染FRH细胞，再次经G418筛选，获得稳定表达双自杀基因的FRH/CD+tk细胞株，用RT-PCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物5-氟胞嘧啶（5-flourocytosine, 5-Fc）和/或无环鸟苷（Ganciciovir, GCV）后，用MTT法测定转基因组及未转基因组FRH细胞的存活率。结果：双自杀基因在FRH细胞中可稳定表达，联合使用5-Fc和GCV对靶细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用5-Fc或GVC。结论：逆转录病毒介导自杀基因可有效杀死肝门部胆管癌细胞，双自杀基因共表达较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用。

逆转录病毒科·自杀基因·胆管肿瘤·基因疗法

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