中国科技论文在线

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2004年12月29日

王占民，常新忠，史朝晖

中华肝胆外科杂志，2002，8（9）：549～551，-0001，（）：

-1年11月30日

目的了解胰腺癌当中P-糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶π及DNA拓扑异构酶Ⅱ三种与耐药相关蛋白的表达与其临床意义。方法采用免疫组化的方法来检测胰腺癌当中上述三种蛋白的表达。结果 P-糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶π及DNA拓扑异构酶Ⅱ在胰腺癌中的阳性率分别为71%、59%和69%其中P-糖蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶π以及谷胱甘肽-S-转移酶π与DNA拓扑异构酶Ⅱ之间的表达具有相关性，DNA拓扑异构酶Ⅱ在高分化的肿瘤组织中阳性率明显低于低分化者，在有淋巴结转移的病人中P-糖蛋白的表达具有更高的阳性率同时有P-糖蛋白和谷胱甘肽-S-转移酶π阳性者的生存期短于阴性者。结论 P-糖蛋白及谷胱甘肽-S-转移酶π在胰腺癌的多药耐药现象中占有重要地位。

胰腺肿瘤， P-糖蛋白，谷胱甘肽-S-转移酶π， DNA拓扑异构酶Ⅱ

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2004年12月29日

【期刊论文】人肝细胞癌细胞系HCC-9903的建立及其生物学特性研究

王占民，刘军，刘博，吴小鹏，高英茂，刘春生

中华外科杂志，2001，39（11）：872～875，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的新建1株人体肝细胞肝癌细胞系，为肝癌研究提供新的、理想的实验模型，方法以手术切除肝癌标本作原代培养，建立细胞系。通过光镜、电镜、倍增时间、生长曲线、双层软琼脂培养、流式细胞仪、染色体分析、刀豆球蛋白凝集试验、裸鼠接种、AFP、HBV及端粒酶检测

肝肿瘤,，实验性，肿瘤细胞,，培养的，组织培养

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2004年12月29日

【期刊论文】联合应用胸苷激酶基因和胞嘧啶脱氨酶基因对MCF-7细胞的杀伤作用

王占民，常新忠，马道新，孙建芝，李志伟

中华实验外科杂志，2004，21（2）：192～195，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的研究双自杀基因（胞嘧啶脱氨酶基因CD和胸苷激酶基因HSV-tk）的应用对乳腺癌细胞的杀伤作用和旁观者效应。方法脂质体法将CD和HSV-tk双自杀基因转染入PA317细胞，用其病毒上清转染乳腺癌细胞MCF-7，G418筛选出阳性细胞MCF-7/CD/tk，然后加入不同浓度的5-氟胞嘧啶（5-Fc）或/和丙氧鸟苷（GCV），MTT法观察其杀伤作用；将不同比例的MCF-7/CD+tk和MCF-7细胞混合，联合应用5-Fc和GCV杀伤，观察其旁观者效应。结果单独应用5-Fc或GCV均能对MCF-7/CD+tk细胞产生明显的杀伤效应，联合应用可以在较小的剂量下产生更大的杀伤作用；当阳性细胞比例达到20%时即可对半数混合细胞产生杀伤作用。结论双自杀基因的应用对乳腺癌细胞具有明显的杀伤作用，其旁观者效应明显。

乳腺肿瘤，胞嘧啶脱氨酶，基因治疗，胸苷激酶基因

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2004年12月29日

【期刊论文】双自杀基因CD、HS V-tk共表达对肝门部胆管癌细胞杀伤作用实验研究

王占民，李志伟，吴小鹏，刘春生，马道新，刘博

中国现代普通外科进展，2004，7（1）：19～22，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：观察逆转录病毒介导的双自杀基因CD、HS V-tk共表达对肝门部胆管癌细胞FRH的杀伤作用，探讨肝门部胆管癌的基因治疗方法。方法：在脂质体Lipofectamine的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PwzlneoCDglytk转导入包装细胞PA317，经G418筛选后培养产病毒的阳性克隆PA317/CD+tk细胞株，收集其病毒上清，转染FRH细胞，再次经G418筛选，获得稳定表达双自杀基因的FRH/CD+tk细胞株，用RT-PCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物5-氟胞嘧啶（5-flourocytosine, 5-Fc）和/或无环鸟苷（Ganciciovir, GCV）后，用MTT法测定转基因组及未转基因组FRH细胞的存活率。结果：双自杀基因在FRH细胞中可稳定表达，联合使用5-Fc和GCV对靶细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用5-Fc或GVC。结论：逆转录病毒介导自杀基因可有效杀死肝门部胆管癌细胞，双自杀基因共表达较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用。

逆转录病毒科·自杀基因·胆管肿瘤·基因疗法