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2004年12月29日

【期刊论文】应用FISH技术对肝癌细胞系HCC-9903X染色体变异的研究

王占民, 刘军, 郑淑芳, 李东华, 吴小鹏, 马道新, 李昭晖, 刘博, 赵志伦, 柯扬

中华普通外科杂志,2003,18(2):105~106,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 研究人肝细胞肝癌细胞系HCC-9903 X染色体畸变规律。方法 建立肝细胞肝癌细胞系HCC-9903,制备其染色体标本,用X染色体着丝粒特异DNA 探针,对其X染色体进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FLSH)检测X染色体拷贝数畸变。结果 HCC-9903肝癌细胞系染色体变异发生率高,其中X染色体改变存在规律,拷贝数增多,以4拷贝为主,X染色体扩增率达99%。结论 X染色体拷贝数增多在肝癌细胞系中发生频率很高,证明在肝癌发病及发展过程中起到某种作用,其意义值得进一步探讨。

癌,, 肝细胞, X染色体, 原位杂交,, 荧光

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2004年12月29日

【期刊论文】双自杀基因CD、HS V-tk共表达对肝门部胆管癌细胞杀伤作用实验研究

王占民, 李志伟, 吴小鹏, 刘春生, 马道新, 刘博

中国现代普通外科进展,2004,7(1):19~22,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的:观察逆转录病毒介导的双自杀基因CD、HS V-tk共表达对肝门部胆管癌细胞FRH的杀伤作用,探讨肝门部胆管癌的基因治疗方法。方法:在脂质体Lipofectamine的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PwzlneoCDglytk转导入包装细胞PA317,经G418筛选后培养产病毒的阳性克隆PA317/CD+tk细胞株,收集其病毒上清,转染FRH细胞,再次经G418筛选,获得稳定表达双自杀基因的FRH/CD+tk细胞株,用RT-PCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-flourocytosine, 5-Fc)和/或无环鸟苷(Ganciciovir, GCV)后,用MTT法测定转基因组及未转基因组FRH细胞的存活率。结果:双自杀基因在FRH细胞中可稳定表达,联合使用5-Fc和GCV对靶细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用5-Fc或GVC。结论:逆转录病毒介导自杀基因可有效杀死肝门部胆管癌细胞,双自杀基因共表达较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用。

逆转录病毒科·自杀基因·胆管肿瘤·基因疗法

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2004年12月29日

【期刊论文】应用FISH技术对肝癌细胞系x染色体畸变的研究

王占民, 刘军, 王学浩, 郑淑芳, 柯扬

肝胆外科杂志,2003,11(2):151~152,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 研究人肝细胞肝癌细胞系X染色体畸变规律。方法 制各三株新建人肝细胞肝癌细胞系HCC-9903、EGHC-990l、HCC-98l0染色体标本,用X染色体着丝粒特异DNA探针,对其X染色体进行荧光原位杂(FISH),检测X染色体拷贝数畸变。结果 三株肝癌细胞系X染色体拷贝数均增多,以4拷贝为主。结论 X染色体拷贝数增多在肝癌细胞系中发生频率很高,证明在肝癌发病及发展过程中起到某种作用,其意义值得进一步探讨。这是以FISH技术对肝癌X染色体拷贝数研究的首次报告。

肝恶性肿瘤, X染色体, 荧光原位杂交(, FISH),

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2004年12月29日

【期刊论文】联合应用胸苷激酶基因和胞嘧啶脱氨酶基因对MCF-7细胞的杀伤作用

王占民, 常新忠, 马道新, 孙建芝, 李志伟

中华实验外科杂志,2004,21(2):192~195,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 研究双自杀基因(胞嘧啶脱氨酶基因CD和胸苷激酶基因HSV-tk)的应用对乳腺癌细胞的杀伤作用和旁观者效应。方法 脂质体法将CD和HSV-tk双自杀基因转染入PA317细胞,用其病毒上清转染乳腺癌细胞MCF-7,G418筛选出阳性细胞MCF-7/CD/tk,然后加入不同浓度的5-氟胞嘧啶(5-Fc)或/和丙氧鸟苷(GCV),MTT法观察其杀伤作用;将不同比例的MCF-7/CD+tk和MCF-7细胞混合,联合应用5-Fc和GCV杀伤,观察其旁观者效应。结果 单独应用5-Fc或GCV均能对MCF-7/CD+tk细胞产生明显的杀伤效应,联合应用可以在较小的剂量下产生更大的杀伤作用;当阳性细胞比例达到20%时即可对半数混合细胞产生杀伤作用。结论 双自杀基因的应用对乳腺癌细胞具有明显的杀伤作用,其旁观者效应明显。

乳腺肿瘤, 胞嘧啶脱氨酶, 基因治疗, 胸苷激酶基因

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2004年12月29日

【期刊论文】P-gp、Gs T-π及TOPOⅡ在胰腺癌中的表达及其临床意义

王占民, 常新忠, 史朝晖

中华肝胆外科杂志,2002,8(9):549~551,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 了解胰腺癌当中P-糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶π及DNA拓扑异构酶Ⅱ三种与耐药相关蛋白的表达与其临床意义。方法 采用免疫组化的方法来检测胰腺癌当中上述三种蛋白的表达。结果 P-糖蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶π及DNA拓扑异构酶Ⅱ在胰腺癌中的阳性率分别为71%、59%和69%其中P-糖蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶π以及谷胱甘肽-S-转移酶π与DNA拓扑异构酶Ⅱ之间的表达具有相关性,DNA拓扑异构酶Ⅱ在高分化的肿瘤组织中阳性率明显低于低分化者,在有淋巴结转移的病人中P-糖蛋白的表达具有更高的阳性率同时有P-糖蛋白和谷胱甘肽-S-转移酶π阳性者的生存期短于阴性者。结论 P-糖蛋白及谷胱甘肽-S-转移酶π在胰腺癌的多药耐药现象中占有重要地位。

胰腺肿瘤, P-糖蛋白, 谷胱甘肽-S-转移酶π, DNA拓扑异构酶Ⅱ

合作学者

  • 王占民 邀请

    山东大学,山东

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