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2005年05月27日

李俊发，曲彦明，，张晓东

CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ANATOMY, 2004, 22 (3): 290～293，-0001，（）：

-1年11月30日

目的：通过观察低氧刺激对培养SY5Y神经母细胞瘤细胞内nPKCε和nPKCθ膜转位激活的影响，以探讨两者是否参与细胞低氧预适应的发生。方法：利用本室建立的体外培养SY5Y细胞低氧刺激模型，并应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、蛋白印记（Western-Blot）等方法，半定量分析SY5Y细胞内nPKCε、nPKCθ的膜转位水平。结果：SY5Y细胞经低氧刺激后，随刺激时间（0.5、2、4、6、8、12和24h）的延长，nPKCε在胞浆内的含量逐渐减少，而胞膜成分中的含量则明显增加，且于低氧刺激2h后的增高水平具有统计学显著意义（P<0.001）；然而nPKCθ在正常情况下只存在于胞膜成分内，且其含量不随低氧刺激时间的增加而改变（P>0.01）结论：nPKCε可能参与了细胞低氧耐受的发生。

低氧， nPKCε， nPKCθ， SY5Y细胞

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2005年05月27日

【期刊论文】低氧预适应增高小鼠脑组织的cPKCγ的膜转位水平

李俊发，崔秀玉，李俊发*，祖鹏宇

生物学报，2004，56（4）：461～465，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

本实验拟通过观察重复性低氧对经典型蛋白激本酶C（Cpkc）膜转位水平激活程度的影响。初步探讨cPKC特定亚型在脑低氧预适应发生发展过程中的作用。按我室已建立的小鼠低氧预适应模型方法，制备重复性低氧1～4次的小鼠（H1～H4）。应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、蛋白印迹（Western holt）等生化技术，并结合Gel Doc 凝胶成像系统，半定时量检测小鼠海马和大脑皮层组织内cPKCα和γ的膜转位水平。实验结果表明，随低氧次数（H1～H4）的增加，小鼠海马组织内cPKCγ的膜转位水平明显增高，且在H2、H3和H4组的变化具有统计学显示著意义（P<0.05，n=6）；而cPKCα亚型无论在大脑皮层还在海马组织内的膜转位比均无统计学意义：上述观察结果显示，cPKCγ膜转位可能在脑低氧适应的发生发展过程中发挥着重要作用；但cPKCβ1、β且以及其它新奇型和非典型PCK特定亚型的变化还有待于进一步的研究和探讨。

脑，氧预适应，经典型蛋白激敏C(， cPKC)，， cPKCγ膜转位，海马，大脑皮层

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2005年05月27日

【期刊论文】低氧预适应增加小鼠脑组织内nPKCε膜转位*

李俊发，王雪梅，李俊发△，祖鹏宇，韩松，吕国蔚

中国应用生理学杂志，2004，20（2）：105～109，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：初步探讨新奇型蛋白激酶C（novel protein kinases C，nPKCs）在脑低氧预适应发生发展过程中的作用。方法：利用蛋白电泳（SDS2PAGE）和蛋白印迹（Western blot）等生化技术，并结合本室已建立的小鼠低氧预适应模型，观察低氧预适应对小鼠海马和大脑皮层组织内nPKCs（nPKCε、δ、η、μ和θ亚型）膜转位（激活）的影响。结果：随低氧次数（H02H4）或低氧耐受时间的增加，小鼠海马（H0：41.6% ± 1.4% vs H1-H4：46.9% ±4.5%，52. 7 ± 3.9%，58.8% ± 2.7%，61.3% ± 3.7%）和大脑皮层（H0：38. 4% ± 4.5% vs H1-H4：42.4% ± 5.0%，48.7% ± 6.5%，55.3% ± 8.9%，61.2% ± 10.2%）组织内nPKCε膜转位明显增加，且海马和大脑皮层分别在H2 、H3 、H4 和H3 、H4具有统计学的显著意义（P < 0.01）而nPKCδ、η、μ和θ亚型在海马和大脑皮层组织内的膜转位变化均无统计学意义。结论：nPKCε可能在脑低氧预适应的发生发展过程中发挥着重要作用，但需进一步的研究证实。

脑低氧预适应，新奇型蛋白激酶C(， nPKCs)，， nPKCε膜转位，海马，大脑皮层

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2005年05月27日

【期刊论文】低氧预适应增加小鼠脑组织蛋白激酶C膜转位

李俊发，韩松，祖鹏宇，杨彩莲，李洪燕，吕国蔚

基础医学与临床，2003，23（4）：399～402，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

初步探讨蛋白激酶C（PKC）在脑低氧预适应发生机制中的作用，以我室建立的小鼠低氧预适应模型，结合SDS2聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS2PAGE）、蛋白印迹（Western bolt）等生化技术，观察了低氧预适应对小鼠大脑皮层及海马组织内PKC膜转位的影响。结果表明，1在小鼠大脑皮层和海马组织内的PKC膜转位均随着低氧次数（小鼠低氧耐受时间) 的增加而增高。特别是低氧3次的海马组织和低氧4次的大脑皮层和海马组织内，PKC膜转位的增加有统计学显著意义。结果提示，PKC的激活可能在脑低氧预适应发生机制中具有重要的作用。

脑低氧预适应，蛋白激酶C， PKC膜转位

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