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2006年12月09日

【期刊论文】抑制Jak3激酶活性诱导NALM-6白血病细胞凋亡*

章崇杰, 胡为民, 张平, 魏大鹏, 赵宗蓉, 蔡美英

华西医大学报,2002,33(1):25~27,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 研究Jak3的活化与急性淋巴细胞自血病(ALL)之间的关系,方法 在不同浓度的Jak3抑制剂AG490处理Jak3活化的ALL前B细胞株NALM-6细胞后,用流式细胞术及噻唑蓝法分析细胞的凋亡、增殖情况。结果 除5umol/L组外,经10、15、20oumol/LAG490处理后NALM-6细胞均有明显的亚G1峰,与DMSO对照相比。凋亡率均有显著增加(P<0.05);噻唑蓝法示除5umol/L组外,与DMSO对照相比。IO、15、20pmol/L AG490均能显著抑制NALM-6细胞的增殖(P<0.05),以上作用呈剂量依赖性关系。结论 Jak3抑制剂AG490能抑制NALM-6细胞的增殖并诱导凋亡,提示Jak3的活化与前B型ALL的发病相关。

Jak3 AG490, 急性淋巴细咆自血病, NALM-6细胞系, 凋亡

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2006年12月09日

【期刊论文】JAKs在ALL骨髓淋巴细胞中的表达和活化*

章崇杰, 张平, 赵宗蓉, 魏大鹏, 蔡美英

国际肿瘤生物治疗杂志,2000,7(4):304~305,-0001,():

-1年11月30日

摘要

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2006年12月09日

【期刊论文】C-未端缺陷JAKs在JAKs表达活化及淋巴细胞白血病细胞生中的作用

章崇杰, 张平, 李兵, 赵宗蓉, 魏大鹏, 蔡美英

中华血液学杂志,2001,22(9):494~496,-0001,():

-1年11月30日

摘要

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2006年12月09日

【期刊论文】C-末端缺陷JAK3逆转录病毒载体的构建及在真核细胞中的表达*

章崇杰, 张平, 毕建虹, 蔡美英, 王蓉, 赵宗蓉, 魏大鹏, 唐梅

华西医大学报,2002,33(4):536~539,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的 以逆转录病毒PLXSN为载体,构建重组逆转录病毒C-末端缺陷的JAK3 c-termdeficient JAK3, JAK3(AC)]载体PLJAK3(AC), 以BALB/C3T3为靶细胞,转染JAK3(AC)CDNA,检测JAK3(△C)蛋白在真核细胞中的表达情况。为利用JAK3(△C)对白血病进行基因治疗的实验研究打基础。方法 用限制性内切酶法从质粒PcDNA3-JAK3(△C)中分离目的基因片段,连接到逆转录病毒载体PLXSN多克隆位点上构建重组逆转录病毒载体PLJAK3(△C),通过转化感受态细菌扩增并检测DNA序列及限制性内切酶酶切鉴定;用脂质体LIPOFECTAMINE介导法将PLJAK3(△C)转染包装细胞PA317细胞,并用G418筛选抗性细胞克隆,收集病毒;用该病毒感染靶细胞BALB/C3T3,G418筛选抗性克隆并测定病毒滴度;抗性细胞扩增培养,细胞溶解后经免疫沉淀(IP)、Western blotting检测BALB/C3T3细胞中JAK3(△C)的表达情况。结果 ①重组逆转录病毒载体PLJAK3(AC)酶切和DNA测序均表明含有2796 bp的JAK3(AC)基因;②病毒滴度为1.2×10 4CFu/ml;③PLJAK3(△C)转染BALB/C3T3细胞中表达出了JAK3(△C)蛋白,其相对分子质量为10 7×10 3。结论 该研究构建的C-末端缺陷JAK3重组逆转录病毒载体PLJAK3(△C)能有效感染PA31 7包装细胞并产生高滴度病毒,同时该病毒能有效将目的基因片段导入真核细胞中并表达。

JAK3(, △C), , 逆转录病毒载体, 真核细胞

合作学者