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2006年11月29日

【期刊论文】结核分枝杆菌临床分离株异烟肼耐药性四种测定方法的比较

胡忠义, 崔振玲, 王洁, 张莹蓉, 陈慧萍, 翁心华

中华结核和呼吸杂志,2005,28(4):245~249,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的探讨噬菌体生物扩增(PhaB)、Baetee-960、最低抑菌浓度(MIC)和基因芯片方法在结核分枝杆菌(MTB)异烟肼(INH)耐药性测定中的应用价值。方法应用4种方法检测167株MTB临床分离株INH耐药性,并比较测定结果的敏感性、特异性和准确性。结果Baetee-960检测敏感株111株,耐药株56株。若以Baetee-960测定结果为判断标准,则PhaB的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为964%、964%、93l%、982%和964%;MIC的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为929%、991%、98l%、965%和970%;基因芯片的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为839%、964%、922%、922%和922%。若以MIC测定耐药性结果为判断标准,则PhaB检测INH耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为100%、956%、914%、100%和970%;Baetee一960的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为98l%、965%、929%、991%和970%;基因芯片的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为887%、965%、922%、948%和940%。结论PhaB检测INH耐药性具有很高的敏感性和特异陆,与Bactec-960及MIC的符合率很高,只需3d时间,且操作简便、不需特殊仪器设备,可作为MTB的INH耐药性快速筛选方法。MIC测定INH耐药陆结果与Bactec-960符合率较高,是否用于INH耐药性测定的判断标准有待进一步研究。基因芯片检测INH耐药性敏感性偏低,只能作为参考方法。

分枝杆菌,, 结核, 抗药性,, 微生物, 分枝杆菌噬菌体, 异烟肼, 基因,, 细菌

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2006年11月29日

【期刊论文】噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌方法学研究

胡忠义, 倪莲娣, 靳安佳, 董惠贤, 钟敏, 李建农, 翁心华

中华结核杂志,2004,27(12):801~805,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的建立噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌试验方法,探讨最佳检测条件。方法应用分枝杆菌噬菌体感染结核分枝杆菌,比较各种检测条件对测定结果的影响,并将所建方法用于痰标本检测,结果与BIOTECLab公司产品比较。结果1×10。噬菌斑形成单位(PFU)/lnl的噬菌体,37C感染60min可检出200-500条/ml结核分枝杆菌。杀毒剂100mmol/ml,室温作用5min可完全灭活受试噬菌体。指示细胞浓度在1×10H条/lnl时,形成的噬菌斑清晰,便于计数。加热灭活的细菌和指示细胞不被噬菌体感染。H32RvH37Ra和牛分枝杆菌参考菌株检测结果均为阳性,7种非分枝杆菌和16种常见非结核分枝杆菌检测结果为阴性,4种非结核分枝杆菌(偶然、胞内、金色、草分枝杆菌)在高浓度时(>1×103条/m1)检测结果为阳性。重复试验结果表明,本法批司和批内变异系数均<15%。痰标本氢氧化钠一半胱氨酸液化方式的阳性检出率为94%(49/52),显著高于氢氧化钠液化结果的62%(32/52,Y2=15.06,P<0.01);预培养1d的阳性检出率为65%(51/78),显著高于未预培养结果的40%(31/78,X2=18.05,P<0.01)。临床标本检测结果表明,我们的试剂与进口试剂检测结果基本相同。结论噬菌体生物扩增法快速、简便、灵敏,有助于结核分枝杆菌的快速检测,但是测定条件的选择极为重要。

分枝杆菌噬菌体, 分枝杆菌,, 结核, 诊断技术和方法

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2006年11月29日

【期刊论文】Rapid Detection of rpoB Gene Mutations in Rifampin-Resistant Mycobacterium tuberculosis Isolates in Shanghai by Using the Amplification Refractory Mutation System

胡忠义, Xiao-Yong Fan, * Zhong-Yi Hu, Fan-Hong Xu, Zhi-Qiang Yan, Sheng-Qi Guo, and Zhong-Ming Li

JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, Mar. 2003, p. 993-997,-0001,():

-1年11月30日

摘要

Rapid detection of drug resistance in Mycobacterium tuberculosis is essential for efficient treatment and control of this pathogen. The amplification refractory mutation system (ARMS) was used to detect mutations in the rifampin resistance-determining region of the rpoB gene. A total of 39 rifampin-resistant M. tuberculosis isolates in Shanghai were analyzed by this assay, resulting in 92.3% sensitivity (36 of 39) and 87.2% concordance (34 of 39) relative to DNA sequencing, by which 41 mutations of 11 different types, including 9 point mutations and 2 deletions, were identified in the rpoB gene. The most frequent mutations were those associated with codon 531 (21 of 39 [53.8%]) and codon 526 (9 of 39 [23.1%]). The results suggest that the ARMS assay is rapid and simple to implement and could be performed for detection of rifampin resistance in M. tuberculosis to complement conventional culture-based methods.

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2006年11月29日

【期刊论文】基因芯片技术及其在结核分支杆菌研究中的应用

胡忠义, 赵建龙

中华结核和呼吸杂志,2001,24(11):693~694,-0001,():

-1年11月30日

摘要

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2006年11月29日

【期刊论文】牛分枝杆菌的噬菌体快速检测方法研究

胡忠义, 钟志军, , 彭广能, 王洁, 秦莲花, 杨华, 白永平, 胡忠义*

中国人兽共患病学报,2006,22(10):9~12,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的建立牛分枝杆酋噬茁体快速检测技术,探讨最佳的检测来件,并将建立的方法用于牛分枝杆菌及16种常见非结棱分枝杆菌和6种其他细菌的检测。结果表明.噬菌体工作浓度为1×108PFU/ml、37C感染2h为最佳检测条件。杀 毒剂浓度在100mmol/L,室温作用10min即可完全杀灭受试噬菌体。选择浓度为4mg/ml的对微生长期指示细菌为工作浓度,获得理想的检测结果。加热灭活的细菌和指示细菌不被噬菌体感染。牛分枝杆菌和耻垢分技杆菌检测结果为阳性。16种常见非结核分枝杆菌和6种其他细菌检测结果均为阴性。该法可检测出60~120条/ml牛分枝杆菌。重复性试验表明,批内、批间变异系数均小于15%,重复性良好。

分技杆菌噬菌体, 牛分枝杆菌, 诊断技术

合作学者

  • 胡忠义 邀请

    同济大学,上海

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