目的研究绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠骨髓间充质干细胞（MSCS）体外定向诱导下的多向分化潜能。方法取6周龄GFP转基因小鼠1只，用密度梯度离心法结合贴壁法体外培养获得GFP转基因小鼠骨髓MSCS有限细胞系（GFP-MSCS）。取第3代GFP-MSCS进行体外多向分化诱导：成骨诱导后进行碱性磷酸酶增殖活性检测及茜素红钙盐染色;成脂肪诱导20d后进行油红O染色鉴定;成神经诱导6h后用免疫组织化学方法检测神经元烯醇化酶（NSE）的表达。结果GFP-MSCS经成骨诱导后ALP表达较对照组明显升高，20d后茜素红染色可见有橘红色钙盐沉积;经成脂诱导后油红O染色阳性;经成神经诱导后，细胞形态由梭形转变为星状细胞，NSE染色呈强阳性表达。结论GFP转基因小鼠骨髓MSCS在体外诱导下具有多向分化能力，对GFP稳定表达无影响，可以作为研究MSCS多向分化潜能机制的一个有效示踪工具。

目的体外研究绿色荧光蛋白（GFP）基因转染骨髓间充质干细胞（MSCS）的方法，并检测基因转染后细胞的生物学特性及分化潜能。方法体外分离培养大鼠MSCS，用重组GFP的腺病毒载体Ad-GFP及脂质体介导质粒PEGFP-C1两种方法转染GFP，流式细胞术观察比较基因转染和表达结果；将腺病毒介导的基因转染细胞经成骨定向诱导后，检测碱性磷酸酶表达和钙结节形成情况。结果重组Ad-GFP对细胞的感染率达（4113±114）%，感染6周后仍有表达；脂质体组转染效率最高为1215%。病毒感染组阳性细胞与未感染组细胞经成骨诱导分化后碱性磷酸酶表达均逐渐增高；诱导3周后茜素红钙盐染色均为阳性。结论重组GFP的腺病毒载体Ad-GFP可高效感染MSCS，基因转染后细胞的增殖分化能力与未转染细胞差异无统计学意义（P>0105），可以作为一种高效的大鼠MSCS的标记方法。

目的研究绿色荧光蛋白（GFP）基因体外转染人脂肪基质细胞的方法，并检测基因转染后细胞的生物学特性及分化潜能。方法体外分离培养人脂肪基质细胞，用重组腺病毒载体Ad-GFP及脂质体介导质粒pEGFP-C1两种方法转染GFP基因，通过流式细胞术观察比较GFP转染和表达的结果;倒置显微镜下观察细胞生长情况；将腺病毒介导的基因转染细胞经成骨定向诱导后，检测碱性磷酸酶表达和钙结节形成情况。结果重组GFP基因的腺病毒Ad-GFP转染的脂肪基质细胞的感染率达（42.5±1.5）%，16h即有GFP表达，7d时表达趋于稳定，感染6周时仍可见有GFP表达，明显优于脂质体转染组（转染效率最高为11.4%）。感染Ad-GFP后的脂肪基质细胞与未感染的对照组脂肪基质细胞成骨诱导分化后碱性磷酸酶（ALP）表达均逐渐增高，两组间差异无统计学意义（P>0105）；诱导21d后两组均见到茜素红钙盐染色阳性。结论重组GFP基因的腺病毒载体Ad-GFP可高效率感染脂肪基质细胞，基因转染后细胞的增殖分化能力未受到影响，可以作为一种高效可靠的人脂肪基质细胞标记方法。

切取4只雄性SD大鼠鼠蹊部皮下脂肪，通过机械分割和组织消化法获得脂肪基质细胞，用人内皮细胞培养基进行定向诱导，倒置显微镜下观察细胞生长状况，并以透射电镜及Ð因子免疫细胞化学方法对诱导后的细胞进行鉴定。SD大鼠脂肪基质细胞经过定向诱导后呈典型的铺路石样单层融合贴壁生长；细胞浆中Ð因子免疫细胞化学染色阳性；透射电镜显示细胞内具有内皮细胞特征性的Weibel-Palade氏小体，细胞边缘可见较多指状突起，胞浆内可见溶酶体等结构。结果证实从SD大鼠皮下脂肪获取得基质细胞经过定向诱导后，可以分化成为内皮细胞，该细胞具有与其它来源的血管内皮细胞相同的特征。皮下脂肪可以成为内源性血管内皮细胞的又一细胞来源。

tomesenchymal cells in the first branchial arch were enzymatically isolated from the mandibular processes of BALB/c mice and were maintained in an intact state in a medium containing leukaemia inhibitory factor. Here, we first evaluated the proliferative activity of the cells after the third passage, using bromodeoxyuridine labelling and in situ hybridization of telomerase mRNA. Positive staining for expression of HNK-1, S-100 and vimentin confirmed that the population of stem cells originated from the ectomesenchyme, which did not express cytokeratin. Then we investigated the molecular and cellular characteristics of the ectomesenchymal cells during their differentiation towards neurogenic, endothelial, myogenic and odontogenic lineages. Expression of multiple lineagespecific genes and proteins was detected by utilizing a range of molecular and biochemical approaches when the cells were transferred to inductive medium. Histological and immunohistochemical analysis of the induced cells at various intervals indicated obvious phenotypic alteration and presence of specific proteins for the differentiated lineages, for example nestin, factor VIII, α-SMA and dentin sialophosphoprotein (DSPP), respectively. Correlatively, results of reverse transcription–PCR corroborated at Mrna level the expression of the characteristic molecules during differentiation. Therefore, it is suggested that the ectomesenchymal cells derived from the first branchial arch may represent a novel source of multipotential stem cells capable of undergoing expansion and variant differentiation in vitro.