利用超薄切片电子显微镜技术对本室分离的风彦病病毒（Rv）JR23株在BHK21细胞中的形态及形态发生过程进行了研究。同时与Rv标准野毒株Gos-10作了比较。结果表明，Rv JR23株盛染BHK21细胞后6h开始干细融浆内观察刊病毒鞭粒，96h达到高峰。病毒颗粒呈圆形。有双层脂质包膜包绕，直径45～75nm。核衣壳25～35nm。细胞裴内见到大量病毒相关颗粒，直径20～30nm病毒包膜米白于细胞禁中的空泡膜或细胞膜。被RV感染的细胞袋中还观察到“繁殖复合体”，由膜性结构包绕着许多类似病毒颗粒的囊泡构成。两株RV在形态与形态发生方面未发现差异。

为了探讨风疹病毒（rubella virus, RV）包膜粮蛋白E2的基因与蛋白的遗传与变异特点，利用DNAstar软件比较JR23株与GenBank中各参考株E2的基因与多肽序列，分析不同RV株E2基因之间的同源性及E2蛋白功能关键区的氨酸变异。结果表明，RV E2基因序列比较保守，但JR23析E2基因序列与其它9个分离析之间有明显差异，变异主要集中在484nt-554nt。同源性为90.3%-92.6%之间，与美国疫苗株RA27/3同源性最高，与美国疫苗株HPV77同源性最低，GenBank中的参考株间同源性较高，在96.3%-100.0%之间。E2多肽变异集中于161aa-185aa，但在E2功能关键区，如N端序列、N联粮基化位点、胞质区等则无明显变异。表明RV E2基因序列相对保守，虽然JR23株与GenBank中各参考株的E2基因序列有明显差异，但JR23株E2蛋白在功能关键区表现出遗传稳定性。此结果为阐明RV分子流行病学特征提供了理论依据，也为研究RV分子进行特征病毒与宿主细胞的相互作用奠写了坚实的基础。

为了研究糖化作用对新城疫病毒（NDV）HN糖蛋白生物学活性的影响，特别是对HN保细胞融合作用的影响，采用基因定点突变技术分别去掉HN分子上的4个糖化位点，然后检测各突变株的细胞表而表达情况、受体识别特性、神经氨酸酶活性、促细胞融合作用、免病沉淀特性等。结果表明，将野毒株NDV HN的细胞表面表达效率定为100%时，K198R-HN突变株的表达效率为82.6%；而对二者的G1、G2、G3和G4 4个糖化位点分别进行定点突发时，得到8种突变株。它们的表达效率均有不同程度的降低，D198R-HN-G2和D198R-HN-G4两种突变47.95%、68.9%、42.67%和41.10%；而D198R-HN突变株的G1、G3和G4突变株的受体识别活性突变前后变化不明显，只有D198R-HN-G2突变株的受体识别活性得以恢复较多，从原来的10.96%恢复到32.88%。野毒株HN突变后神经氨酸酶活性普遍降低，尤以G4影响明显，公为野毒株的9.60%而D198R-HN突变株突变后神经氨酸酶活性普遍升高，尤以G2恢复最高，由原来的0.45%恢复到7.59%，野毒株HN的G1、G2、G3和G4突变前后细胞融合情况变化不大；而D198R-HN的G1、G2、G3和G4P突变后，D198R-HN-G1、D198R-HN-G3、D198R-HN-G4没有变化，但D198R-HN-G2使D198R-HN的细胞融合活性得以恢复30.90%。野毒株HN电泳时吴现1条较宽的泳带，当突变掉1个糖化位点时，泳动速度加快。D198R-HN突变株及D198R-HN-G1、D198R-HN-G3和D198R-HN-G4 HN突变株电泳时，呈现两条模糊不清的条带。但D198R-HN-G2突变株HN电泳时，其条带变得窄而锐利，且泳动速度快。上述结果说明糖链能影响HN的表达或从细胞浆运输到细胞表面，G2对HN的受体识别活性影响较大，推测G2糖链部分结构的改变影响到了HN G2周围的表型特性，从而导致神经氨酸酶活性，促细胞融合作用的改变。

目的 建立一种定量分析副粘病毒包膜糖蛋白融合细胞功能的方法。方法 将vTF-7重组痘苗病毒感染BHK21细胞后，分别转染侍测基因DNA和pCIN17β-gal DNA，16h后将两个细胞群混合，37℃ 15h后用NP-40裂解细胞。取上清进行显色反应，在SOFTMAX软件支持下用ELISA自动测定性在570mm测吸光度A值。结果 指示基因法与细胞计数法有密系，r=0.9890（P<0.01）；与面积断法的符合率达100。最佳主要应成条件包括：16mmol/L底物浓度；显色反应20～25min；1μgDNA转染量；每种细胞量接种1×105个。结论 指示基因法是一种非常敏感、特异、可重复性好的细胞融合定量分析方法。可用于副粘病毒细胞融台作用功能的研究。并可作为其他病毒细胞融合作用研究的参考，具有较大的推广应价值。

为了确定副粘病毒融合蛋白（F）分子上活性位点中亮氨酸在F的细胞融合作用中的作用。弄清F融合细胞的分子机理，采用基因定点突变法创造一个酶切位点，用酶切反应初步筛选突变株，然后用DNA序例分析进一步确定，并在真核细胞内时行表达，Giemsa染色和指示基因法检测细胞融合功能，荧光强度分析（FACS）表达效率。结果表明，hPIV3F第460位亮氨酸（L）和第474位亮氨酸（1）分别突变成丙氨酸（A）（L460A和147A）时，细胞融合功能分别只相当于野毒株的51.24%和48.73%；而第467位L和第481位L分别突变成A（L1467A和L481A）时，细胞融合功能则无明显改变；当第460和467位L同时突变成A（L460A-L467A）时，细胞融合功能降低了79.13%；而474位1和第481位L同时突变成A（1474A-L481A）时，细胞融合功能无明显改变。NDV F第481位L和488位L分别突奕成A（L481A和L488A）时，细胞融合功能分别降低了75.22%和80.04%；将二者共同突变时，则进一步降低，只有野毒株的10.13%。各突变株的表达效率没有改变。说明F分子上与HN相互作用的L，突变后细胞融合作用不同程度下降。