支气管哮喘（以下简称哮喘） 是呼吸系统疾病中的一种常见病，现在认为哮喘是气道慢性炎症性疾病，以肺部可逆性气流阻塞、气道黏膜炎症和气道高反应性为特征。近年来，主要在磷酸二酯酶、磷脂酶D、中枢神经系统在哮喘发病过程中的神经免疫调节作用和新药开发等方面进行了研究，并建立了相应的实验研究方法，为今后进一步的研究工作打下坚实基础。

研究隐孔菌多糖成分对大鼠气道高反应性的影响，初步探索其作用机制。方法：采用卵白蛋白致敏雾化吸入攻击制备大鼠哮喘模型，隐孔菌多糖成分A、B （5mg/kg、20mg/kg）和酮替芬（5mg/kg）及溶媒对照（等量生理盐水）灌胃10d。用甲酰胆碱激发气道高反应性后，行支气管肺泡灌洗和腹腔灌洗，计数支气管肺泡灌洗液中细胞总数并分类，和腹腔灌洗液中脱颗粒肥大细胞及白细胞分类。结果：隐孔菌多糖成分A、B均能明显抑制致敏大鼠抗原攻击后气道阻力的增加及肺顺应性的下降；减少支气管肺泡灌洗液中白细胞总数，降低嗜酸细胞的数目，以多糖B作用更明显；多糖A和多糖B也明显抑制腹腔肥大细胞脱颗粒及腹腔嗜酸性粒细胞的渗出。结论：隐孔菌多糖A、B成分抑制大鼠的气道高反应性，其作用可能与稳定肥大细胞膜、抑制嗜酸细胞炎症和趋化有关。

上皮完整或去上皮的豚鼠离体气管以300Lmol•L-1硝普钠（SNP）预处理1h，使SNP对抗乙醋甲胆碱气管收缩作用的剂量反应曲线右移1.3-1.5倍，最大舒张率下降41%-58%，形成SNP气管松弛作用的耐受性82溴环鸟苷酸可模拟SNP在豚鼠离体气管形成的SNP耐受性，谷胱甘肽（1mmol•L-1）及环核苷酸磷酸二酯酶（PDE）V抑制剂扎普司特（30Lmol•L-1）均可部分翻转SNP的气管松弛作用耐受性，而蛋白合成抑制剂环己酰亚胺（10Lmol•L-1）对SNP的耐受性无预防作用。结果表明SNP可产生豚鼠离体气管松弛耐受性，这可能是由于气管平滑肌中环鸟苷酸（CGMP）积聚而下调鸟苷酸环化酶（GC）活性和上调PDEÍ活性。

human PDE4A was improved by ammonium sulfate fractionation, DEAE Sephadex A-50 chromatography, and Sephadex G-100 chromatography. The activity of PDE4A was measured by high performance liquid chromatography (HPLC). RESULTS: Induced PDE4A activity expressed in crude yeast cell GL62 supernatant and pellet was (340±21) nmol•g-1•min-1 and (250±25) nmol•g-1•min-1 respectively. The specific activity of recombinant PDE4A in supernatant was improved 6.4 fold. Ciclamilast, piclamilast, and rolipram could inhibit PDE4A activity. The IC50 values (95% confidence limits) of ciclamilast, piclamilast, and rolipram were 1.27 (0.84-1.91), 66.4 (33.3-132.2), and 3.73 (2.51-5.53) μmol/L respectively. Zaprinast, aspirin, and indomethacin had no obvious inhibitory effect on PDE4A activity. CONCLUSION: The specific activity of PDE4A expressed in yeast cell GL62 can be improved by ammonium sulfate fractionation, DEAE Sephadex A-50 chromatography, and Sephadex G-100 chromatography. Ciclamilast, piclamilast, and rolipram can inhibit PDE4A activity while zaprinast, aspirin, and indomethacin have no obvious inhibitory effect on PDE4A activity. Human PDE4A expressed in GL62 might be useful in the research and screening of new selective PDE4 inhibitors.

目的：研究硝普钠（SNP）与异丙肾上腺素（ISO）对犬气管平滑肌松弛作用是否存在协同关系，并分析协同的机制。方法：采用放射免疫分析法测定犬气管平滑肌环核苷酸量，并用磷酸二酯酶（PDE）同工酶抑制剂为工具分析SNP与ISO相互作用的机制。结果：SNP（1～100Lmol•L-1）增强ISO（30Lmol•L-1）对3Lmol•L-1乙酰甲胆碱预收缩的犬气管平滑肌的松弛作用。SNP（100Lmol•L-1） 与ISO（30Lmol•L-1）对犬气管平滑肌松弛的协同作用伴有气管平滑肌中CAMP积聚比SNP与ISO单独时分别增加112倍与014倍。PDEÍ 抑制剂扎普司特（3 Lmol•L-1）使SNP的气管平滑肌CGM P积聚由214倍增加到416倍，可进一步增加气管松弛作用112倍。合并PDEË抑制剂氰胍哒嗪（30Lmol•L-1）和PDEÌ抑制剂咯利普兰（30Lmol•L-1）或合并SNP（100Lmol•L-1） 和咯利普兰（30Lmol•L-1）均能进一步增强ISO的气管cAMP积聚与松弛作用。结论：SNP是通过气管平滑肌cGMP含量增加而抑制PDEË，导致SNP与ISO对气管松弛的协同作用。