CRISPR敲除GPRC5A抑制肺癌紫杉醇耐药细胞迁移

王文越洋; 程堉; 郭育阳; 高亮; 陈琛; 夏春伟

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CRISPR敲除GPRC5A抑制肺癌紫杉醇耐药细胞迁移

首发时间：2024-04-29

王文越洋 ¹
王文越洋，男，本科，药理学
程堉 ¹ 郭育阳 ¹ 高亮 ¹ 陈琛 ¹ 夏春伟 ²
夏春伟，男，主任

1、江南大学生命科学与健康工程学院，江苏无锡，214122
2、南京市胸科医院十大病区呼吸内科，江苏南京，210029

摘要：目的：本课题拟解决临床病人PTX耐药问题，观察关键靶标分子GPRC5A对肺癌敏感和PTX耐药细胞的迁移的影响，并探讨其机制。方法：GEO数据库筛选GPRC5A为潜在耐药靶点。荧光定量PCR（qPCR）和蛋白免疫印迹（Western blot，WB）检测肺癌敏感和耐药细胞中GPRC5A的mRNA和蛋白的表达量，在人肺癌紫杉醇耐药细胞H1703中用CRISPR-Cas9技术敲除GPRC5A，WB验证敲除效率。将细胞分为NCI-H1703对照组、NCI-H1703-PTX实验组、H1703-PTX-KO-GPRC5A实验组，比较Transwell小室细胞迁移的情况。结果：3个GSE数据集以logFC大于1.4倍和p<0.0001的筛选标准交互到2个基因，选取GPRC5A是潜在紫杉醇耐药靶标分子，发现紫杉醇耐药细胞中GPRC5A的mRNA和蛋白表达量显著高于其对应的敏感细胞，H1703肺癌细胞迁移能力远低于H1703-PTX耐药细胞，耐药细胞敲除GPRC5A后，细胞迁移能力显著下降。结论：GPRC5A是潜在的肺癌紫杉醇耐药的靶标分子，并促进肺癌细胞的迁移。?????

关键词：肺癌;紫杉醇;耐药;迁移;GPRC5A

For information in English, please click here

CRISPR knockout of GPRC5A inhibits the migration of paclitaxel-resistant cells in lung cancer

wangwenyueyang ¹
王文越洋，男，本科，药理学
chengyue ¹ guoyuyang ¹ gaoliang ¹ chenchen ¹ xiachunwei ²
夏春伟，男，主任

1、Jiangnan University School of Life Sciences and Health Engineering,Jiangsu Wuxi,214122
2、Department of Respiratory Medicine Ten endemic areas, Nanjing Chest Hospital,Jiangsu Nanjing 210029

Abstract：Objective: To investigate the key role of GPRC5A on lung cancer sensitivity and the migration of paclitaxel (PTX) resistant cells. Methods: The GEO database screened GPRC5A as a potential drug-resistant target. We use Quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) and Western blot（WB）to detect the mRNA and protein expressions of GPRC5A in sensitive and resistant lung cancer cells. CRISPR-Cas9 technology was employed to knockout GPRC5A in human lung cancer PTX-resistant cell H1703, and WB was used to verify the knockout efficiency. Cells were divided into the NCI-H1703 control group, NCI-H1703-PTX experimental group, and H1703-PTX-KO-GPRC5A experimental group. Cell migration was compared using Transwell chamber assays. Results: Three GSE datasets were intersected using a screening criterion of logFC greater than 1.4 and p<0.0001, resulting in two genes, and GPRC5A was selected as a potential target of the paclitaxel resistance. The mRNA and protein levels of GPRC5A in paclitaxel-resistant cells were significantly higher than in their corresponding sensitive cells. The migration ability of H1703 lung cancer cells was much lower than that of H1703-PTX resistant cells, and the knockout of GPRC5A significantly decreased the migration ability of the resistant cells. Conclusion: GPRC5A, as a target of paclitaxel resistance, promotes migration of lung cancer cells.

Keywords： lung cancer, paclitaxel, drug resistance, migration, GPRC5A gene?????

基金：

1. 中国博士后科研基金（2020M681492)，中国科协CRISPR敲除GPRC5A抑制肺癌紫杉醇耐药细胞迁移2019年度中外优秀青年交流项）

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王文越洋，程堉，郭育阳，等. CRISPR敲除GPRC5A抑制肺癌紫杉醇耐药细胞迁移[EB/OL]. 北京：中国科技论文在线 [2024-04-29]. https://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/202404-294.

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论文编号	202404-294
论文题目	CRISPR敲除GPRC5A抑制肺癌紫杉醇耐药细胞迁移
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