【目的】环状RNA（circular RNA，circRNA）在可变剪接、转录调控和来源基因的表达调控等方面具有重要功能。本研究旨在探究意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica，简称意蜂）工蜂中肠发育过程中circRNA的表达谱及其发育过程中的差异表达circRNA（differentially expressed circRNA,DEcircRNA），进而在转录组水平探究DEcircRNA在中肠发育中的作用。【方法】基于前期获得的意蜂7和10日龄工蜂中肠样品（Am7和Am10）的全转录组数据，利用find_circ软件从质控后的数据中预测circRNA。采用RPM算法归一化处理得到circRNA的表达量。利用DESeq软件对circRNA进行差异分析，按照差异倍数（fold change）≥2、P＜0.05及错误发现率（false discovery rate，FDR）＜0.05条件筛选DEcircRNA。通过BLAST比对GO和KEGG数据库，对DEcircRNA的来源基因进行功能和代谢通路注释。利用TargetFinder软件预测DEcircRNA-miRNA及DEcicRNA-miRNA-mRNA调控网络，通过Cytoscape v.3.2.1软件对调控网络进行可视化。通过实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR,RT-qPCR）验证测序数据的可靠性。【结果】意蜂中肠各样品比对上参考基因组的短序列读段数平均为19 616 356条。Am7与Am10的组内Pearson相关系数均在0.950及以上。共预测出256个DEcicRNA，包括105个上调circRNA和151个下调circRNA。Novel_circ_009675和novel_circ_013879分别在Am7和Am10中高量表达。DEcircRNA的来源基因可注释到包括结合、单组织进程及细胞进程在内的32个GO条目，其中分别有35、35和7个来源基因注释到催化活性、代谢进程和应激反应。上述来源基因还可注释到35条KEGG代谢通路，其中分别有5、5和4个来源基因注释到Hippo信号通路、内吞作用和吞噬体；进一步分析发现分别有1、2和2个来源基因注释到磷酸肌醇代谢、淀粉和蔗糖代谢和半乳糖代谢等物质代谢通路，5、4、3、1和1个注释到内吞作用、吞噬体、溶酶体、泛素介导的蛋白水解和MAPK信号通路等免疫通路。上述结果表明相应的DEcircRNA广泛参与意蜂工蜂中肠的生长发育、新陈代谢和免疫防御。DEcicRNA-miRNA调控网络分析结果显示，141个DEcircRNA可靶向结合107个miRNA，其中多数仅能结合1-2个miRNA，但novel_circ_011577和novel_circ_010719结合的靶miRNA数可达32和28个；此外，mir-136-y、ame-miR-6001-3p及mir-136-y结合的circRNA数最多，分别为15、14和14个；表明相应的DEcircRNA可作为竞争性内源RNA在意蜂中肠发育过程发挥作用。进一步构建DEcicRNAs-ame-miR-6001-3p-mRNA调控网络，分析结果显示14个DEcicRNA可共同靶向结合ame-miR-6001-3p，表明它们可能通过调控ame-miR-6001-3p对意蜂中肠干细胞的分裂和分化进行间接调控。随机选取6个DEcricRNA进行RT-qPCR验证，结果显示5个的表达量变化趋势与测序结果一致，证实了本研究测序结果的可靠性。【结论】通过对意蜂工蜂中肠发育过程中的DEcircRNA深入分析，提供了circRNA在意蜂工蜂中肠发育过程中的表达谱和差异表达信息，揭示了DEcircRNA在中肠发育过程中的作用，为中肠发育相关的关键circRNA的筛选和功能研究打下了基础。