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期刊论文
rDNA介导的多拷贝整合表达载体的构建及其在酿酒酵母工业菌株中的应用
山东大学学报(理学版),2005,40(3):105~109,-0001,():
根据酵母整合质粒的设计要求,PCR扩增特定的2.2kb rDNA片段,并以此替换酿酒酵母(Saccharomyces cerevi-siae)整合载体YIp5的URA3片段;在此基础上,引入G418抗性基因KanMX和酵母磷酸甘油激酶(phosphoglycerate kinase,PGK)组成型强启动子和终止子序列(PGKp2t),构建适合酿酒酵母工业菌株高拷贝整合表达载体pYMIKP。以细菌木糖异构酶(xylose isomerase,XI)基因xylA为目标基因,通过载体pYMIKP引入到酵母工业菌株NAN227中。酵母转化子在非选择培养条件下,连续生长50世代质粒稳定性为99.72%。目标基因高拷贝重组菌的木糖异构酶比酶活是对照菌株的67.2倍,达到0.672UPmg蛋白,实现了外源基因在酿酒酵母工业菌株中的稳定高效表达。
【免责声明】以下全部内容由[鲍晓明]上传于[2009年02月20日 15时46分57秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。
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