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江丽芳
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期刊论文
Ⅱ型登革病毒E基因的克隆及其酵母表达*
中国人善共患病杂志，2003，19（6）：31～33，-0001，（）：
目的 克隆2型登革病毒E基因并用酵母真核表达，获得全长的重组E蛋白，为其结构与功能的研究提供条件。方法 从感染DEN2（NGC株）后病变的C6/36细胞上清中提取RNA，通过RT-PCR扩增E基因片段，与载体pPICZaB连接筛选得到重组质粒，电穿孔法将重组体整合入酵母菌P. pastoris，经抗生素Zeocin筛选产生的转化子进行表型鉴定，取Mut菌诱导表达，SDS-PAGE、免疫印迹检测表达产物。结果 RT-PCR得到1.5kb的E基因片段，酶切鉴定与测序显示重组质粒含DEN2全长E基因；Mut 酵母转化菌可分泌表达约69kDa的蛋白，与DEN2 E单抗的免疫印迹证实它为型特异的重组E蛋白。结论 成功将克隆的全长DEN2 E基因在酵母菌中表达，获得的重组E蛋白具有免疫反应性。
【免责声明】以下全部内容由[江丽芳]上传于[2009年04月27日 14时51分11秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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