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期刊论文
原核真核双表达加强型绿色荧光蛋白质粒的构建
扬州大学学报(农业与生命科学版),2000,24(1):1~4,-0001,():
将原核启动子Ptrc和加强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因从EGFP原核表达质粒pYA 33342EGFP上切下,然后将其插入至真核表达质粒pVAX1真核启动子Pcmv的下游,构建成具有真核和原核启动子的双表达杂合质粒pVAXD2EGFP,其长度为3823bp。将pVAXD2EGFP分别转化鼠伤寒沙门氏菌X4550和转染CO S27细胞,应用流式细胞术、可见光谱扫描、SDS2PAGE测定EGFP原核表达;应用荧光显微镜观察EGFP在CO S27细胞内的表达。重组鼠伤寒沙门氏菌X4550(pVAXD2EGFP)表达EGFP的量与仅以原核方式表达EGFP的X4550(pYA 33342EGFP)相当;将质粒pVAXD2EGFP转染CO S27细胞,EGFP可在CO S27细胞核和胞浆表达,在荧光显微镜下发出强烈荧光。结果表明:不仅成功地构建原核、真核表达集中于同一质粒的新型质粒pVAXD2EGFP,而且原核、真核目的蛋白表达量达到很高水平,显示其在新型重组细菌疫苗方面有着诱人的应用前景。
【免责声明】以下全部内容由[焦新安]上传于[2005年04月29日 17时57分54秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。
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