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李庆阁
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期刊论文
双重实时PCR快速同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌
中华微生物学和免疫学杂志，2004，24（12）：1004～1007，-0001，（）：
目的建立改良分子信标2双重实时PCR同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌的快速方法，应用于霍乱监测、副溶血弧菌食物中毒的快速诊断和海产品检验。方法根据GenBank公布的霍乱弧菌肠毒素基因A亚单位（ctxA）和副溶血弧菌的耐热直接溶血毒素基因（TDH）的保守序列，分别设计引物和改良分子信标探针，以10种细菌作对照，建立双重实时PCR2改良分子信标检测体系，应用于副溶血弧菌食物中毒快速诊断和霍乱监测。结果改良分子信标2双重实时PCR 反应体系DNA灵敏度为102.4～166.6fgPμl，菌液灵敏度为32～64CFUPml或3～6CFUPPCR反应体系，无交叉反应。此反应体系同时检测40株副溶血弧菌和50株霍乱弧菌，均出现特异的荧光信号，两种细菌检测互不干扰。对3起细菌性食物中毒共48份样品和100份海产品进行检测，9份副溶血弧菌实时PCR阳性，其中7份副溶血弧菌细菌培养阳性，其余样品都为阴性。从样品处理到检测结果仅需1天时间。结论改良分子信标2双重实时PCR 检测体系快速、灵敏度高、特异性强，可用于霍乱和副溶血弧菌食物中毒的快速诊断，为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。
【免责声明】以下全部内容由[李庆阁]上传于[2005年07月14日 17时30分05秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
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