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曲章义

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期刊论文

流感病毒RNA聚合酶PA亚基重组质粒pQE32-PA-2转化效率的实验研究

曲章义郭英

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摘要/描述

目的 将甲型流感病毒RNA聚合酶PA亚基的基因工程重组质粒pQE32-PA-2转化入受体菌,并优化转化条件,以建立其高效、快速的转化体系。方法 以大肠杆菌DH5a菌株为受体菌,研究了氯化钙溶液浓度(0、25、50、75、100、150mmol/L),热休克温度(0、30、37、42、50℃),转化时间(7、15、30、45、60、75、90、105、120min)及转化后的向温浴时间(0、0。5、1、1。5、2hr)对基因工程重组质粒pQE32-PA-2转化效率的影响。结果 氯化钙溶液浓度及热休克温度对转化效率的影响极为显著,转化时间在一定范围内对转化效率有明显的影响,而转化后的温浴时间对转化效率的影响不明显。结论 在本实验条件下,以75mmol/L氯化钙制备感受态细胞,转化30分钟,经42℃热休克作用90秒后直接涂平板选择转化子,可获得高效、快速的转化效果。

【免责声明】以下全部内容由[曲章义]上传于[2009年08月07日 17时33分13秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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