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邢诒刚

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期刊论文

人胰岛样生长因子腺病毒表达载体构建及其在C17.2神经干细胞的表达☆

邢诒刚Wang Li-mei Wang Yi-dong Shen Qing-yu Xiao Song-hua Xing Yi-gang

中国临床康复,2005,9(17):48-50,-0001,():

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摘要/描述

目的:构建人胰岛素样生长因子腺病毒表达载体,并观察其在C17.2神经干细胞的表达。方法:实验于2004-03/11在中山在学附属第二医院林百欣医学中心完成。将胰岛素样生长因子克隆往复制缺陷性腺病毒穿梭质粒得到含水量胰岛素样生长因子的腺病毒穿梭质粒,再与腺病骨架质一在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组得到含胰岛素样生长因子的整合质料,在HEK293A细胞中包装加膜,聚合酶链反应鉴定,大量扩增病毒。将含目的基因的病毒转染C17.2神经干细胞,原位杂交检测胰岛素样生长因子mRNA,蛋白印迹检测胰岛素样生长因子蛋白的表达,酶联名疫吸附实验检测胰岛素样生长因子蛋白的表达曲线。结果:经酶切鉴定及聚合酶链反应鉴定证实腺病毒载体构建正确。原位杂交检测到胰岛素样生长因子Mrna,蛋白印迹分析检测到胰岛素样生长因子蛋白在转染了重组腺病毒的C17.2神经干细胞内表达。酶联免疫吸附实验结果显示胰岛素样生长因子蛋白在病毒转染5~d达高峰,13d仍高于转染前。结论:成功构建了含胰岛素样生长因子的重组腺病毒载体,转染了该腺病毒C17.2神经干细胞可稳定表达胰岛素样生长因子。

【免责声明】以下全部内容由[邢诒刚]上传于[2006年01月12日 18时39分01秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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