提示
张龙现
-
44浏览
-
0点赞
-
0收藏
-
0分享
-
122下载
-
0评论
-
引用
期刊论文
巢式PCR检测隐孢子虫卵囊的研究
畜牧兽医学报/Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica 2003, 34 (5), 509-514，-0001，（）：
隐孢子虫病是一种重要的人畜共患原虫病。为了在临床样品中更准确、快速地检测隐孢子虫卵囊,从初步纯化的含有不同数量隐孢子虫卵囊的样品中和含有不同数量隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中,直接提取DNA或用DNA纯化试剂盒对提取的奶牛粪便中卵囊DNA进行纯化之后用作起始PCR( Primary-PCR)模板,以起始PCR的产物为模板进行巢式PCR(Nested-PCR),用2对人工合成寡核苷酸分别作为两个PCR的引物,扩增片段大小分别为1325 bp和820 bp。优化了Mg2+浓度、引物浓度和dNTP浓度,并进行了特异性检验。建立的巢式PCR具有隐孢子虫属特异性,不仅扩增出新鲜样品DNA提取物中的目的片段,而且扩增出放置6年之久的DNA提取物中的目的片段。样品经过初步纯化之后,起始PCR和巢式PCR最低检测值卵囊分别为2186×103个/ml和≤2186个/ml;从含有隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中提取DNA,尔后经过DNA纯化试剂盒纯化,其起始PCR和巢式PCR 粪便中卵囊最低检测值分别为2186×107个/g和≤2186个/g。有望发展为试剂盒。
【免责声明】以下全部内容由[张龙现]上传于[2007年05月22日 10时30分52秒]，版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点，与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立，不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考，并请自行承担全部责任。
本学者其他成果
同领域成果
