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期刊论文
疯牛病和羊痒病WESTERN BLOT检测方法的建立*
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以朊蛋白单抗AH6和碱性磷酸酶标记的酶标马抗鼠二抗建立了疯牛病和羊痒病的Western Blot检测方法。对Western Blot各种反应条件进行摸索,并确定了最佳工作条件,结果表明:当匀浆缓冲液为RIPA时最佳反应条件为浓缩胶内电泳电压为恒压90V,分离胶电泳电压为恒压160V,转印的最佳电压和时间为恒压100V 1.5小时;封闭液为3%BSA时,封闭15分钟,封闭效果最好;AH6的最佳稀释浓度为1:4000,4℃下孵育过夜,马抗鼠二抗的最佳稀释浓度1:1000,室温下孵育30 分钟。采用已确立的反应条件对样品进行检测并与Prionics®-Check WESTERN进口试剂盒的检测结果比较,发现其敏感性为100%,特异性为99.4%,而进口试剂盒分别为100%,100%,与进口试剂盒无显著差异,这为在该基础上建立国产试剂盒提供了条件
【免责声明】以下全部内容由[赵德明]上传于[2005年05月28日 00时15分38秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。
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