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钟翠平

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期刊论文

小鼠次级淋巴组织趋化因子成熟肽基因/腺相关病毒重组载体的构建

钟翠平梁春敏钟翠平*郑宁吴欣孙瑞霞刘银坤叶胜龙

解剖学报,2004,4(2):147-151,-0001,():

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摘要/描述

目的 构建含小鼠次级淋巴组织趋化因子(SLC)cDNA的重组腺相关病毒载体。方法 以C57BL/6J小鼠的淋巴组织为材料抽提总RNA,用RT-PCR方法克隆小鼠SLC的成熟肽基因。PCR产物回收后经EcoRI和Xho双酶切,插人pAAv-IRES-hrTGFP质粒,用磷酸钙法,与pAAV-Rc和pHetpeR三者共同转染HEK293细胞。包装成重组的病毒颗粒,并通过绿色荧光蛋白(CFP)报告基因荧光检测及抽提病毒DNA,进行PCR扩增等进一步证实重组病毒的形成。结果 约500bp的小鼠SLC成熟肽基因被成功克隆,序列分析表明,所克隆的SLC基因与基因库注册的相同,组载体的酶切及测序鉴定表明SLC基因被定向插入。重组载体转染HEK293细胞,经荧光显微镜和病毒DNA的PCR检测,证实已完成对重组病毒的包装。并表达GEP。结论 成功构建了SLC成熟肽基因重组腺相关病毒载体。

【免责声明】以下全部内容由[钟翠平]上传于[2009年03月30日 09时24分28秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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