目的　将弓形虫SAG1基因截短片段(t-SAG1)，分别用植物组成型E35S启动子和番茄果实特异性E8启动子驱动，构建t-SAG1植物表达载体。方法　自本室构建的p ET32a-t-SAG1载体中PCR扩增得到t-SAG1基因，克隆进T载体为pMD-T-t-SAG1，酶切鉴定后进行测序确认。用Bam H Ⅰ单酶切连接方式将t-SAG1分别亚克隆进pB35MG、pB35E1MG、pBE2MG载体，分别构建中间载体pB35-t-SAG1、pB35E1-t-SAG1、pBE2-t-SAG1载体。其中，pB35-t-SAG1以E35S 驱动t-SAG1，3′端携带NOS3′终止子序列，组成E35S/ t-SAG1/ NOS3′操纵子结构单元。pB35E1-t-SAG1含E35S和番茄果实特异性E8 启动子核心序列E81. 1 双启动子驱动t-SAG1，组成E35SE81. 1/ t-SAG1/ NOS3′操纵子结构单元。pBE2 t-SAG1以番茄果实特异性E8启动子全长E82. 2 驱动t-SAG1，组成E82. 2/ t-SAG1/ NOS3′操纵子结构单元。pB35-t-SAG1、pB35E1-t-SAG1、pBE2-t-SAG1经酶切证实后，分别将其中E35S/ t-SAG1/ NOS3′、E35S - E81. 1/ t-SAG1/ NOS3′、E82. 2/ t-SAG1/ NOS3′操纵子结构单元以Hind Ⅲ单酶切连接方式亚克隆进pCAMBIA2300质粒中，构建植物表达载体pC35-t-SAG1、pC35E1-t-SAG1、pCE2-t-SAG1，酶切鉴定。含三种启动子驱动t-SAG1的植物表达载体转化根癌农杆菌LBA4404感受态细胞后，PCR 鉴定农杆菌中的t-SAG1。结果　重组质粒用酶切鉴定均得到预期大小片段：CR鉴定转化入根癌农杆菌LBA4404的t-SAG1基因扩增得到预期700bp大小片段：pMD-T-t-SAG1测序结果表明t-SAG1基因序列完全正确，读码框正确。结论　成功构建t-SAG1中间载体pB35-t-SAG1、pB35E1-t-SAG1、pBE2-t-SAG1，以及植物表达载体pC35-t-SAG1、pC35E1-t-SAG1、pCE2-t-SAG1，并将三种植物表达载体成功导入根癌农杆菌，为弓形虫转基因番茄口服疫苗的研究奠定了基础。