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周元国

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期刊论文

实时荧光定量RT.PCR在小鼠及人G蛋白mRNA检测中的应用

周元国熊仁平陈星云刘苹夏季陈建国

中国生物化学与分子生物学报,2005,21(5):685~690,-0001,():

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摘要/描述

用自行设计的TaqMan双标探针和扩增引物建立检测鸟苷酸结合蛋白(G-protein) mRNA的实时荧光定量RT-PCR技术,用G蛋白纯品绘制定量标准曲线,实时荧光定量PCR仪检测ECV304细胞和小鼠G蛋白mRNA水平.10 timol/L Gqa mRNA反义寡核苷酸(GqaODN)作用ECV304细胞24 h后,Cqa的mRNA表达显著下降(3.18×lOs±1.75 x 108拷贝下降到1.44×106±4.82 x 105拷贝),48h和72 h下降更明显;Gsa和Gi2a酌mRNA表达变化不显著.10 /imol/L Csa mRNA反义寡核苷酸(Gsa ODN)作用ECV304细胞24h后, Csa的mRNA表达显著下降(2.97×108±2.68×107拷贝下降到4.16×106±2.00×106拷贝),48 h和72 h下降更明显;Gqa、Ci2a表达变化不显著,小白鼠油酸致伤后6h, Gqa mRNA表达显著下降(1.16×108±8.73×106拷贝下降到3.30×106±1.68×106拷贝),24 h下降更显著(9.32×107±1.47×107拷贝下降到4.14×106±1.67×106拷贝);Gsa和Gi2a表达变化的趋势同Gqa mRNA.结果准确可靠,重现性好.说明建立的实时荧光定量RT-PCR方法成功地实现了对ECV304细胞和小白鼠肺组织G蛋白不同亚型不同丰度基因表达的检测

关键词: 实时PCR 定量 TaqMan探针 G蛋白 RNA

【免责声明】以下全部内容由[周元国]上传于[2009年11月08日 15时47分26秒],版权归原创者所有。本文仅代表作者本人观点,与本网站无关。本网站对文中陈述、观点判断保持中立,不对所包含内容的准确性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保证。请读者仅作参考,并请自行承担全部责任。

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