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2005年03月03日
【期刊论文】减毒鼠伤寒沙门氏菌全长hpaA基因工程菌的构建*
陈旻湖， 朱森林， 陈洁， 胡品津， 李国庆
微生物学报，2002，42（1）：27～32，-0001，（）：
-1年11月30日
为构建表达HpaA蛋白的重组成减毒鼠伤寒沙门氏菌，并探讨以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体构建H pylori疫苗株的意义，应用PCR法从H pylori基因组DNA中扩增783bp的hpaA基因，经酶切-连接反应将其克隆入原核表达质粒pTre99A的NcoI-Sal I位点，并进行了核苷酸序列测定。重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261，提取重组菌质粒，PCR和酶切鉴定，筛选阳性克隆。用SDS-PACE电泳和Western blot进行HpaA表达分析和鉴定，用薄层扫描分析HpaA含量。重组菌C57BL/6小鼠喂滋，分批两d和10d后处死小氧，取脾和未段回肠进行细菌培养，挑菌落提质粒鉴定。结果表明，经PCR和酶切证实，构建了含783bp hpsy基因的重组原核表达质粒，并将后者成功转化了减毒伤寒沙门氏菌。重组菌能表达约30kD HpaA蛋白，重组HpaA量约占全菌体蛋白量的38.9%，Western blot证实其有免疫反应性。小鼠重组菌喂灌两d或10d后，脾和未段回肠均发现携目的基因的菌落。这些结果提示了构建了表达H.Pylori HpaA R重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,为制备以减毒伤寒沙门氏菌为抗原释放系统的H. pylori口康活疫苗进行了有益探索。
幽门螺杆菌,， hpaA基因,， 鼠寒沙门氏菌,， 疫苗,， 和理组
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2007年12月19日
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2007年12月19日
【期刊论文】Different T helper type immune responses induced by Helicobacter pylori vaccine in mouse model
陈旻湖
，-0001，（）：
-1年11月30日
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