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2005年07月12日

【期刊论文】日本血吸虫未成熟卵抗血清对日本血吸虫cDNA文库的免疫筛选

汪世平, 何卓, 刘立鹏, 徐绍锐, 吕志跃

热带病与寄和虫学, 2003,1(3):132~134 ,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的为了获得抗雌虫生殖和卵胚发育相关抗原的血吸虫基因。方法通过采用抗日本血吸虫未成熟卵SIEA26-28kDa免疫血清对日本血吸虫成虫cDNA文库进行筛选。结果共获得阳性克隆23个,经重复筛选之后,随机挑取其中的5个阳性克隆,分别进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳显示获得单一扩增条带,其大小位于 50bp~1.5kb之间。结论从sj cDNA文库中筛选出抗卵相关阳性克隆,有关分析鉴定在进一步进行中。

日本血吸虫, cDNA文库, 未成熟卵, 免疫筛选

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2005年07月12日

【期刊论文】日本血吸虫SIEA28kDa分子抗原的二维凝胶电泳分析

汪世平, 刘立鹏, 谭耀武, 徐绍锐, 何卓, 吕志跃

中国血吸虫病防治杂志,2004,16(1):8~12,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的分析鉴定日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原(SIEA)28kDa抗原组分。方法用高效液相离子交换法对电泳纯SIEA 28kDa抗原组分进一步分离纯化,对获得的色谱纯SIEA28kDa抗原组分进行二维凝胶电泳分析。结果SIEA经双向凝胶电泳分离、银染后获得的SIEA22D图谱蛋白斑点以p13~7和Mw14~66kDa范围最多。进一步经图象采集、PDQ uest 2D 软件分析SIEA双向电泳图谱,计算在相同的设定值条件下获取的蛋白质斑点数,测得SIEA22D电泳图谱平均为(948±89)个蛋白质斑点数。电泳纯SIEA28kDa抗原组分用高效液相离子交换法纯化后,280、220nm波长色谱图均为一个两侧对称、光滑的高峰曲线,色谱洗脱液对其活性光密度图也为一个两侧对称、光滑的高峰曲线。二维凝胶电泳银染色可见一个显色饱和度高的蛋白质圆斑,免疫印迹分析为一个显色饱和度高的单一圆斑。结论色谱纯SIEA28kDa抗原组分为单一分子,其等电点为5.7。

日本血吸虫, S IEA 28kD 抗原, 二维凝胶电泳, 蛋白质鉴定

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2005年07月12日

【期刊论文】日本血吸虫初产卵体外培养的研究

汪世平, 钟飞, , 汪世平**, 李文凯, 徐绍锐, 吕志跃

中国人兽共患病杂志,2004,20(7):561~565,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的观察日本血吸虫未成熟虫卵超免疫血清对虫卵胚胎发育及雌虫生殖力影响的效果。方法本研究通过体外培养系统,观察日本血吸虫成虫离体产卵及虫卵发育全过程中形态学特点的变化,检测抗未成熟虫卵超免疫血清对虫卵胚胎发育及雌虫生殖力的影响。结果在含正常兔血清的培养基中,初产卵经12~14天培体外培养后,能完成发育至成熟期,对照组雌虫每周产卵总数为17657个(n=20)。但在含有抗未成熟虫卵超免疫兔血清的培养基中,雌虫产卵数量较正常兔血清培养对照组有显著降低(P<0.001);在培养后第10天,试验组雌虫即停止产卵,部分初产卵卵胚的发育和成熟过程被完全阻断;免疫荧光染色显示,抗卵免疫血清可作用于卵胚细胞及雌虫卵黄腺、肠腔内膜组织。结论体外培养结果表明,日本血吸虫未成熟虫卵抗原诱导的免疫应答,在抗虫卵胚胎发育及抗雌虫生殖产卵中起重要作用。

日本血吸虫, 未成熟虫卵, 体外培养, 胚胎发育, 免疫荧光染色

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2005年07月12日

【期刊论文】日本血吸虫天然抗原分子的柱层析分离纯化与鉴定

汪世平, 彭先楚, 汪世平*, 周松华, 姜孝新, 吕志跃, 徐绍锐, 肖小芹, 曾少华, 余俊龙, 戴橄, 李文凯, 吴仕筠

Journal of Tropical Medicine Vol. 5 No.1 Feb. 2005,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的分离纯化日本血吸虫成虫(AWA)和未成熟虫卵(SIEA)可溶性抗原中的单一蛋白,为血吸虫病免疫诊断、预防提供新的抗原分子。方法柱层析分离纯化成虫和未成熟虫卵可溶性抗原,SDS-PAGE及银染色进行分析鉴定。结果得到了三种不同大小血吸虫分子抗原AWA18000um,SIEA42000u,SIEA130000u。结论实验证明柱层析法是一种快速分离纯化血吸虫单一组分抗原简单而有效的方法。

日本血吸虫, 未成熟虫卵, 抗原, 柱层析, 纯化

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2005年07月12日

【期刊论文】日本血吸虫未成熟虫卵糖蛋白抗原生物学特性的初步分析

汪世平, 朱平安, 刘立鹏, 曾宪芳, 徐绍锐

中国血吸虫病防杂志,2002,14(2):92~94,-0001,():

-1年11月30日

摘要

目的分析日本血吸虫未成熟卵糖蛋白抗原的生物学特性。方法利用SDS-PAGE、银染色、PAS及脂类染色对SIEA组分进行分析,并根据标准分子量迁移率RF值,用半对数坐标纸绘图,测算各区带的分子量。结果SIEA有10种糖蛋白分子,其分子量为101、97、91、87、77、74、66、62、56、50、kDa;1条37kDa脂蛋白区带。结论SIEA含有蛋白、糖蛋白、脂蛋白等抗原分子,可能在宿主的免疫应答中发挥不同的作用。

日本血吸虫, 未成熟卵, 糖蛋白

合作学者

  • 汪世平 邀请

    中南大学,湖南

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