为了解Dystrophin基因缺失断裂点和连接片段的序列特点，以分析Dystrophin基因缺失的分子机制，利用巢式反向PCR克隆了1名51号外显子缺失DMD （Duchenne Muscular Dvstrophy, DMD）患者的缺失连接片段，通过测序，确定5'和3'断裂点及连接片段的序列。对5'、3'断裂点和连接片段进行重复序列、TOPOⅠ、TOPOⅡ酶切位点等分析。结果共测得50号内含子1614bp，确定该患者Dystrophin基因的5'断裂点位于THE1（Transposon-like Human Element，THE）内，3'断裂点位于L2序列内。连接片段有3bp的连接同源序列cta，局部无小的缺失、插入和碱基置换。本研究首次在50号内含子内发现一THE1序列，再次发现Dystrophin基因的缺失断裂点位于THE1结构内。反向PcR操作简单、耗时短，可以推扩应用于缺失连接片段的克隆；THE1可能与部分Dystrophin基因的缺失有关；Dystrophin基因缺失大多与同源重组无关，非同源末端连接可能参与了Dystrophin基因缺失的形成。

目的 观察骨髓间质干细胞（MSC）穆植治疗Duchenne肌营养不良症（DMD）动物模型dko小鼠后肌组织dvstrophin/utrophin的表达情况。方法 用体外培养纯化的第5代MSC经尾静脉穆植治疗dko小鼠，穆植后5、10、15、20周分别取实验鼠腓肠肌组织做荧光免疫组化检测dvstrophin/utrophin的表达，计算阳性纤维的平均光密度。结果 传3代以上呈集落生长的MSC均一性好，静脉穆植免疫反应低。穆植后5-20周dko小鼠肌膜组织dvstrophin/utrmphin免疫荧光表达强度有随着时间逐渐递增的趋势，穆植15周前后肌膜荧光带光密度有显著性差异（P=0.035）。结论MSC在体内外均具有强大的可塑性，通过血液循环MSC可趋向病变肌组织，并分化为表达dvstrophin/utmphin的肌纤维，干细胞穆植对dko小鼠肌萎缩组织有一定修复作用。

目的 研究骨髓干细胞移植治疗Duchenne型肌营养不良鼠（dystrophin/utrophin gene double knock-oulmice, dko鼠）的运动功能改善情况，方法 获取4～5周龄C57BL/6鼠的骨髓干细胞，体外培养3d，以1.0×107/只静脉移植到经7Gy r射线预处理的dko鼠（7～8周龄）。8～9周后，检测移植鼠运动功能、肌电图及肌肉组织dystrophin蛋白表达情况。结果骨髓干细胞移植8-9周后，11只dko鼠牵引运动坠落次数为（3.09±2.47）次，与对照组（非移植组）dko鼠（16.78±3.6）次比较，有显著性差异；肌电图指标中，动作电位时限和最大收缩电位波幅分别为（4.99±1.62）ms和（2872±1474.33）+V，与对照组（3.69±0.40）ms和（1210.00±551.00）+V比较，有显著改善；其肌肉组织有7%肌纤维表达了dystrophin蛋白。结论静脉移植同种、同系鼠骨髓细胞后，dko鼠的运动功能、电生理有了显著改善；其部分骨骼肌细胞有缺失蛋白的表达。提示干细胞移植治疗DMD有较理想的前景。