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2009年10月21日

【期刊论文】灭活SARS冠状病毒疫苗对小鼠脏器影响的实验研究*

王一飞，杜彬，钟雪云，熊盛，张传海，刘新建，刘石生，张美英，李久香，陆家海，万卓越，鄢心革，郑焕英，范江林

中国病理生理杂志，2004，20（7）：1187～1189，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：探讨灭活SAILS冠状病毒疫苗对小鼠是否有损伤作用。方法：用灭活SARS冠状病毒分别免疫BALB/c和C57BL/6小鼠；ELISA法检测小鼠血清中抗SARS冠状病毒抗体水平；免疫8周后取小鼠各脏器，观察其病理形态学改变。结果：免疫8d后，小鼠血清中就可检测到特异的Ig，M、IgG抗体；组织切片染色观察，可见少数小鼠肺及肝组织出现轻度损伤，其他脏器未见病变。结论：SAILS冠状病毒灭活疫苗可诱导小鼠产生特异性抗体，同时没有造成严重的器官损伤。这将为SARS疫苗进入临床研究打下基础。

严重急性呼吸综合征; 冠状病毒; 疫苗，灭活; 小鼠

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2009年10月21日

【期刊论文】重组人抑癌相关蛋白核苷二磷酸激酶A的原核表达*

王一飞，冉延超，王一飞△，熊盛，张美英，黄文韬，罗林波，刘秋英

中国病理生理杂志，2004，20（6）：954～959，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：为提高表达量，简化纯化工艺，获得可用于临床研究的重组人NDPK-A蛋白，构建带有6×His纯化标签的原核表达载体，优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性。方法：将抑癌基因nm23-H/从质粒pBVNMH1中亚克隆于带有纯化标签的表达载体pQE40中；梯度变化表达条件获得产物高表达；镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白；Western blot鉴定产物的免疫原性；HPLC测定产物的激酶活性；鸡胚尿囊膜试验鉴定产物抑制血管新生的生物活性。结果：pQE-40中亚克隆的nm23-H/序列无误；目的蛋白最高表达量可达49.6%；纯化的表达产物能与天然NDPK-A的多克隆抗体特异结合；酶比活为472U/rag；具有抑制鸡胚尿囊膜血管新生的活性。结论：表达质粒-nm23HI能高效表达重组人NDPK-A，纯化工艺简便，产物活性与天然NDPK-A无异。

核苷二磷酸激酶，肿瘤抑制蛋白质类

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2009年10月21日

【期刊论文】BALB/C小鼠对不同佐剂SARS灭活疫苗的早期免疫反应①

王一飞，熊盛，刘新建，张美英，张传海，刘石生，冉延超，杨红宇李久香

BALB/C小鼠对不同佐剂SAILS灭活疫苗的早期免疫反应第6期，-0001，（）：

-1年11月30日

摘要

目的：研究含不同佐剂的SARS灭活疫苗免疫小鼠后，小鼠的早期细胞免疫和体液免疫反应。方法：灭活的SARS冠状病毒F69株分别与弗氏佐剂、氢氧化铝、CpG佐剂配伍，制备灭活疫苗。接种6周龄SPF级BALB/C小鼠。定时采血，分析小鼠外周血中CD4 、CD8 T细胞亚群动态变化，同时测定鼠血清中特异性IsG抗体及抗体的病毒中和活性。结果：由3种佐剂制备的SARS灭活疫苗免疫小鼠后，CIM 、CD8 T细胞百分比升高或无明显改变，CIM/CD8比值无显著性改变。其中，寸鲁一佳剂疫苗免疫小鼠的CIM T细胞百分比升高较明显，且在一段时间内，维持在一个较高的水平；铝佐剂疫苗免疫小鼠后，未观到明显 I‘细胞亚群改变；而cpG佐剂疫苗免疫小鼠的CD8 T细胞百分比改变较其它佐剂疫苗改变更明显。与此相异的是种爰茁均可诱导小鼠产生较高滴度特异性IsG抗体，并且所产生的抗体具有中和活性。在初免后第3-4天，3种佐剂抗体滴度分别为1∶12800、1∶3200和1∶1600，中和效价分别为1∶2560、1∶960和1∶320。结论：SARS灭活疫苗接种小f 可诱导较强的体液免疫反应，同时轻度上调CD4+、CD8+T细胞活性，程度因佐剂而异。

SARS，灭活疫苗， T细胞亚群， IgG抗体，中和活性

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